[发明专利]一种高纯度龙胆苦苷的制备方法

说明书

本发明公开了一种高纯度的龙胆苦苷的制备方法，其是将龙胆属植物在溶剂提取后，经大孔树脂层析富集，纯化后的料液经氧化铝或酸性氧化铝精制，精制液经浓缩回收酒精、浸膏干燥，甲醇结晶，离心分离结晶沉淀，干燥，得到纯度大于90％的龙胆苦苷，然后重结晶，结晶经干燥，获得纯度大于98％的龙胆苦苷单体。本发明涉及的溶剂与分离介质均可重复利用，且重现性好，操作简单，适合工业化批量生产。

技术领域

本发明涉及裂环烯醚萜苷类提取及分离技术领域，尤其涉及一种高纯度龙胆苦苷的制备方法。

背景技术

龙胆苦苷属于裂环烯醚萜苷类化合物，含糖基，极性大，具有吸湿性和酸、碱、强光、高温条件下不稳定性。它是传统中药材龙胆、秦艽、獐牙菜等及其中成药的主要功效性成分，具有多种生理活性，如利胆、保肝、健胃、降压、抗炎、抗氧化，抗菌等功效。龙胆苦苷在化妆品中主要功效表现为抗敏，消红肿，止痒，对特异性皮炎和过敏有抑制刺，起到抗炎的作用；另外还具有清热燥湿的功效，可改善皮肤干、痒等敏感不适的状态，增强皮肤天然免疫力；龙胆苦甙对芳香化酶的活化，显示对皮肤局部的雌激素水平有作用，加之对弹性蛋白酶的抑制和抗氧性，使其具有抗衰老的作用；对表皮细胞胆甾醇的分泌有促进作用，可改善油性粗糙皮肤的状态；也用作生发剂、皮肤增白和保湿剂。

目前已有文献报道高纯度龙胆苦苷的制备工艺，例如利用不同树脂多次纯化使其纯度提高，该技术存在试剂使用量大，生产周期长、成本相对较高的问题。其中使用离子交换树脂纯化的工艺，其离子交换树脂再生时需要使用到大量的酸或碱溶液，存在安全与环保问题；另外，大孔树脂纯化的提取物(龙胆苦苷≥50％)的水溶液(提取物浓度2500mg/L时)pH值3～4，呈弱酸性，加入稀碱液调至pH8.0，HPLC检测水溶液中龙胆苦苷浓度，由初始值1250mg/L降至1106mg/L，表明龙胆苦苷碱不稳定，因此使用弱碱和碱性阴离子交换树脂纯化龙胆苦苷会使其发生降解，导致得率偏低，纯化后的提取物其龙胆苦苷的含量可能并不会显著提高。使用弱酸性或酸性的阳离子交换树脂进行纯化，则会因龙胆提取物水溶液呈酸性，呈酸性的物质难以与树脂发生离子交换，最终导致龙胆苦苷纯度提高不显著。而直接使用反相液相制备高纯度龙胆苦苷，其设备和填料昂贵，规模化生产不及本发明高效和价廉。再如料液在树脂纯化后使用价廉的硅胶进行柱层析纯化，其效率低，解吸附时使用的有机试剂量大，一般需要两种及以上的不同极性的试剂联合使用，且硅胶再生成本较高。至今在工业上还没有龙胆苦苷纯度在90％及98％以上的快速、高效、批量生产、得率高且价廉的制备工艺。

发明内容

本发明的目的是提供一种以含龙胆苦苷的植物为原料适用于工业生产的高纯度的龙胆苦苷的制备方法，该方法能实现降低耗能、降低溶剂损耗、提高产品收率，最终能制备出龙胆苦苷质量含量大于98.0％的产品。

本发明提供的技术方案如下：

一种高纯度的龙胆苦苷的制备方法，具体步骤如下：

1)以龙胆科植物的根或全草为原料，将药材进行前处理；

2)将1)中前处理好的药材中加入水或乙醇水溶液溶剂，进行热回流或搅拌提取；

3)将2)中水提后的料液在固液分离后进行大孔树脂柱纯化富集；

4)将3)中大孔树脂柱醇洗富集液进行中性或酸性氧化铝柱精制，收集上样流出液，并在上样结束后用1-5倍柱体积的树脂洗脱酒精度相同的醇溶液顶洗中性或者酸性氧化铝层析柱，然后浓缩上样流出液与顶洗液回收酒精，浓缩液真空干燥；

5)向4)中得到的干燥品中加入适量的甲醇，于60-70℃条件下使物料达到过饱和溶解；

6)将5)中的饱和溶液低温静置结晶，然后离心或过滤分离出晶体沉淀，再用甲醇将沉淀淋洗一遍，然后将沉淀热干燥或者冻干，可得到纯度大于90％的龙胆苦苷。

优选的，步骤(1)中的龙胆科植物包括坚龙胆、条叶龙胆、三花龙胆、秦艽、粗茎秦艽、麻花秦艽、小秦艽和獐芽菜。