[发明专利]用NK细胞上TIGIT和TIM-3确定乙肝相关肝癌预后的系统

说明书

本发明提供了一种TIGIT和TIM‑3作为生物标志物在判断乙肝相关肝癌患者预后中的应用。所述TIGIT和TIM‑3是所述患者NK细胞上的TIGIT和TIM‑3，其在NK细胞上的表达可用于辅助预测乙肝相关肝癌患者的疾病进展和结局。此外，本发明为患者提供了新的治疗靶点，为未来的乙肝相关肝癌免疫治疗提供新的思路。

技术领域

本发明属于肝癌诊断领域，具体地，本发明涉及乙肝相关肝癌进展的生物标志物及其在乙肝相关肝癌的预后中的应用。

背景技术

肝癌是一种常见的恶性肿瘤，根据2018年全球癌症统计数据，肝癌的死亡率在全球癌症中排名第四。乙肝病毒感染是肝癌的最主要原因，而乙肝相关肝癌(Hepatitis BVirus Related Hepatocellular Carcinoma，HBV-HCC)的高发病率和死亡率一直是这个领域的研究重点。

能够在一定程度上反映肿瘤细胞恶性生物学行为的生物标志物，已经广泛用于肿瘤或癌症的早期检测或诊断、进展监测、预后评估等，至少可以作为一种辅助评估手段，为临床医生和患者提供非常重要的诊断信息，从而帮助针对性地实现个体化的精准医疗。而就乙肝相关肝癌患者的疾病进展监测，目前本领域尚缺乏可靠、合适的生物标志物及其相关手段与方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何对乙肝相关肝癌患者的肿瘤进展和生存进行预后预测。

本发明的发明人从NK细胞上存在的多种共抑制分子中发现，T细胞免疫球蛋白和酪氨酸基抑制基域(TIGIT)与T细胞免疫球蛋白结构域和粘液蛋白结构蛋白3(TIM-3)的共表达与乙肝相关肝癌进展呈正相关，与患者的临床预后不良有关。不受任何理论的限制，发现TIGIT和TIM-3协同介导乙肝相关肝癌患者NK细胞耗竭。

因此发现，乙肝相关肝癌患者的NK细胞上TIGIT和TIM-3可以作为一种生物标志物，二者在NK细胞上的(共)表达情况可以提供患者预后信息。基于上述发现，本发明提供以下技术方案。

一方面，本发明提供一种检测TIGIT和TIM-3表达的试剂在制备用于判断乙肝相关肝癌患者预后的产品中的应用。

在本发明的上下文中，术语“乙肝相关肝癌”是指既往已诊断为慢性乙型病毒性肝炎，同时根据2017年卫生部修订的《原发性肝癌诊疗规范》的诊断标准执行诊断的癌症。

优选地，所述TIGIT和TIM-3分别是所述患者NK细胞上的TIGIT和TIM-3。相应地，所述试剂检测所述患者NK细胞上的TIGIT和TIM-3的表达。因此，优选地，所述应用包括检测来自患者的样本中NK细胞上的TIGIT和TIM-3表达。根据本发明的具体实施方式，所述样本为血液，例如外周血。分离外周血中的单个核细胞，可以检测其中的NK细胞上TIGIT和TIM-3表达，例如表达与否或表达量(表达水平)。

根据本发明的具体实施方式，所述试剂可以分别是特异性结合TIGIT的抗体或其片段和特异性结合TIM-3的抗体或其片段，例如单克隆抗体或其片段，所述片段保持了抗体与TIGIT或TIM-3的特异性结合能力。在本发明的上下文中，针对来自患者的样本，所述试剂可以通过特异性结合细胞上TIGIT和TIM-3，检测这两种蛋白在细胞上的表达与否或表达量(表达水平)。

优选地，所述产品为检测试剂盒。

另一方面，本发明提供一种用于判断乙肝相关肝癌患者预后的系统，所述系统包括：

(1)样本处理模块，其设置为从所述患者获得外周血单个核细胞；

(2)检测模块，其设置为针对通过样本获取模块获得的外周血单个核细胞，检测其中NK细胞上TIGIT和TIM-3表达，得到TIGIT和TIM-3双阳性NK细胞(TIGIT⁺TIM-3⁺NK细胞)的比例，所述比例为TIGIT和TIM-3均为阳性的NK细胞的数量占相对NK细胞的总数量的比例；和