[发明专利]基于发夹结构DNA为模板的铜纳米簇荧光探针快速定量检测溶液中链霉素的方法

权利要求书

1.基于发夹结构DNA为模板的铜纳米簇荧光探针的制备方法，其特征在于，先将DNA冻干粉利用MOPS缓冲液溶解制成DNA溶液；然后将DNA溶液与第一部分磷酸缓冲盐溶液混合得到混合液，90℃保温10分钟，自然冷却至室温，得到发夹结构DNA；接着将发夹结构DNA与第二部分磷酸缓冲盐溶液、硫酸铜溶液、抗坏血酸溶液混匀室温避光反应3分钟，得到荧光铜纳米簇溶液，即为所述的荧光探针。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，DNA的序列如下：

5’-ATATATATATATGGCCCGTTTAAAGTAGTTGAGAGTATTCCGTTTCTTTGTGTCATATATATATAT-3’，如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，MOPS缓冲液包含：3-吗啉丙磺酸20mmol/L，氯化钠300mmol/L，pH＝7.5。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，DNA溶液、第一部分磷酸缓冲盐溶液、第二部分磷酸缓冲盐溶液、硫酸铜溶液、抗坏血酸溶液的体积比为5：40：35：10：10，其中，DNA溶液、硫酸铜溶液、抗坏血酸溶液的浓度依次为10μmol/L、2mmol/L、10mmol/L。

5.利用权利要求1～4所述制备方法得到的基于发夹结构DNA为模板的铜纳米簇荧光探针。

6.权利要求5所述铜纳米簇荧光探针在链霉素定量检测中的应用。

7.基于发夹结构DNA为模板的铜纳米簇荧光探针快速定量检测溶液中链霉素的方法，具体步骤如下：先向盛有权利要求5所述纳米簇荧光探针的离心管中加入链霉素溶液，混合孵育，并利用荧光分光光度计测定链霉素溶液加入前后的荧光强度，进而确定溶液中链霉素的含量。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，孵育条件为：室温条件下避光孵育10分钟。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，链霉素浓度在0～20mg/L的范围内，铜纳米簇的荧光强度降低值与链霉素的浓度呈线性关系，线性回归方程为y＝-10.31x+240.17，线性回归系数R²为0.9954，检出限为4.36μg/L。