[发明专利]一种苦地丁高效液相特征图谱方法的构建

说明书

本申请公开了一种可适用于整体控制苦地丁药材、饮片、标准汤剂、提取液、配方颗粒及苦地丁其它制剂质量的高效液相特征图谱检测方法。本发明采用高效液相色谱建立了苦地丁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的特征图谱，并确定了7个特征峰，其中6号峰为紫堇灵峰。本发明所建立的HPLC特征图谱检测方法色谱条件梯度简单，色谱峰峰形好，分离度、专属性好，精密度高，稳定性、耐用性好，有利于评价苦地丁制剂生产全过程相关工艺的科学性、合理性，用于指导生产制备过程投料、规范生产操作，更能整体控制苦地丁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒及其它苦地丁制剂的内在质量，实现全过程质量控制，确保苦地丁的临床用药的安全、有效、稳定。

技术领域

本申请涉及一种苦地丁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒和其它苦地丁制剂的特征图谱的HPLC检测方法，属于中药检测、鉴别领域。

背景技术

苦地丁是为罂粟科植物地丁紫堇的全草。具有清热解毒，活血消肿的功效。常用于流行性感冒，上呼吸道感染，支气管炎，急性肾炎，黄疸，肠炎，疔疮肿毒，淋巴结结核，眼结膜炎，角膜溃疡。

苦地丁化学成分较多且复杂，含有紫堇灵、乙酰紫堇灵、原阿片碱、黄连碱等多种生物碱。另外还含有香豆素、甾体皂甙、酚性物质、中性树脂和挥发油等。目前，《中国药典》2020年版一部项下收载了采用高效液相色谱法测定紫堇灵的含量，尚未建立特征图谱检查方法及标准。其它，有一篇文献研究了苦地丁药材（苦地丁药材超高效液相色谱指纹图谱研究）指纹图谱，但该方法存在以下问题：1）流动相梯度较多，条件过于复杂，必然导致条件难于转移；2）色谱峰分离度差，基线波动极其严重；3）未进行中间精密度和耐用性考察，即使非常微小的条件变动也可能导致方法不耐用，仅能在论文发表单位等极少数单位使用，无法实现试验室间的顺利转移，无法用来控制苦地丁药材的质量。另外，该报道是单独针对苦地丁药材建立的指纹图谱，未见苦地丁饮片、标准汤剂、配方颗粒指纹图谱研究的报道。苦地丁标准汤剂和配方颗粒均经水溶液提取、浓缩所得，化学成分主要是水溶性强的极性化合物，另外，在中药提取过程中经常存在物质之间的转化，其成分和苦地丁药材、饮片差别很大，因此，现有的检测方法无法用于苦地丁标准汤剂、配方颗粒的成分检测，无法有效对比和分析苦地丁药材、饮片、标准汤剂、苦地丁提取液、配方颗粒化学成分的差异与变化，难以深入认识苦地丁药效物质基础在从药材→饮片→提取液→浓缩液→喷干粉→配方颗粒成品的工艺过程的传递情况，难以整体评价和控制从苦地丁药材、饮片到配方颗粒成品的工艺过程。因此，建立统一的苦地丁药材、饮片、标准汤剂、提取液、浓缩液、喷干粉、配方颗粒特征图谱测定方法，可用于指导生产制备过程投料、规范生产操作，有利于评价苦地丁制剂生产全过程相关工艺的科学性、合理性，更能整体控制苦地丁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒及其它苦地丁制剂的内在质量，实现全过程质量控制，确保苦地丁的临床用药的安全、有效、稳定。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种适用于苦地丁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒及其它苦地丁制剂的HPLC特征图谱检测方法，该方法色谱条件梯度简单，色谱峰峰形好，分离度好，专属性好，精密度高，稳定性、耐用性好，易于验室间转移，可用于评价苦地丁制剂生产全过程工艺的合理性，更能整体控制苦地丁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒及其它苦地丁制剂的内在质量，实现全过程质量控制，确保苦地丁的临床用药的安全、有效、稳定。

本发明的苦地丁制剂全过程、整体的HPLC指纹图谱的检测方法，包括如下操作步骤：

1）参照物溶液的制备：取对照品，溶解，即得对照品参照物溶液，取对照药材，提取，即得对照药材参照物溶液。

2）供试品溶液的制备：取苦地丁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒，经提取，取续滤液，即得。

3）将苦地丁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒、参照物溶液采用高效液相色谱仪分析，得到苦地丁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC特征图谱。

其中步骤1）的参照物溶液包括对照药材参照物溶液和紫堇灵对照品参照物溶液。