[发明专利]一种苦地丁高效液相特征图谱方法的构建

权利要求书

1.一种苦地丁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC的特征图谱检测方法，其特征在于：它包括以下步骤：

1）参照物溶液的制备：取对照品，溶解，即得对照品参照物溶液，取对照药材，提取，即得对照药材参照物溶液；

2）供试品溶液的制备：取苦地丁药材、饮片、标准汤剂、提取液冻干粉、配方颗粒，经提取，取续滤液，即得；

3）将苦地丁药材、饮片、标准汤剂、提取液冻干粉、配方颗粒、参照物溶液采用高效液相色谱仪分析，得到苦地丁药材、饮片、标准汤剂、提取液冻干粉、配方颗粒的HPLC特征图谱。

2.根据权利要求1所述的参照物溶液，其特征在于参照物溶液包括对照药材参照物溶液和紫堇灵对照品参照物溶液。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤2）所述提取溶剂是指甲醇、水、甲醇-水溶液中任一一种，加入溶剂量为10-60倍。

4.根据权利要求1、3所述的检测方法，其特征在于：步骤2）所述提取方法如下：

取苦地丁药材粉末适量，研细，取约2.0g，置具塞锥形瓶中，加入水溶液25mL，加热回流1h，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得苦地丁药材供试品溶液；

取苦地丁饮片粉末适量，研细，取约2.0g，置具塞锥形瓶中，加入水溶液25mL，加热回流1h，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得苦地丁饮片供试品溶液；

取苦地丁标准汤剂冻干粉样品适量，研细，取约0.5g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25mL，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得苦地丁标准汤剂冻干粉供试品溶液；

取苦地丁水溶液提取液冻干粉样品适量，研细，取约0.5g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25mL，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得苦地丁提取液冻干粉供试品溶液；

取苦地丁配方颗粒样品适量，研细，取约0.5g，置具塞锥形瓶中，加入50%甲醇25mL，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得苦地丁配方颗粒供试品溶液。

5.根据权利要求1所述的苦地丁药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的HPLC特征图谱的检测方法，其特征在于，所述HPLC的色谱条件为：以甲醇为流动相A，以0.1%~0.3%磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱，流速为0.8~1.2ml/min，柱温为25~35℃，检测波长为275~300nm；进样量为3~12μl。

6.根据权利要求1和5所述的HPLC特征图谱的检测方法，其特征在于，所述HPLC的色谱条件为：流速为1.0ml/min，柱温为30℃，检测波长为289nm。

7.的检测方法，其特征在于梯度洗脱条件为：0~5min，流动相A的体积分数变化为8%~15%，流动相B的体积分数变化为92%~85%；5~25min，流动相A的体积分数变化为15%~35%，流动相B的体积分数变化为85%~65%；25~50min，流动相A的体积分数变化为35%~60%，流动相B的体积分数变化为65%~40%。

8.根据权利要求1、5、6和7所述的HPLC特征图谱检测方法，其特征在于：所用色谱柱为Atlantis T3色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）。

9.根据权利要求1、5、6、7和8所述的检测方法，其特征在于：苦地丁药材、饮片、标准汤剂冻干粉、提取液冻干粉、配方颗粒的特征图谱的特征在于：

1）供试品色谱中应呈现7个特征峰，并应与对照药材参照物色谱中的7个特征峰保留时间相对应，其中1个峰应与紫堇灵对照品参照物峰的保留时间相对应；

2）与紫堇灵参照物峰相对应的峰为S峰，计算峰1、2、3、4、5、7与S峰的相对保留时间，依次应为：0.19，0.21，0.23，0.35，0.83，1.22且其相对保留时间应在规定值的±10%范围之内。