[发明专利]一种TIPE3免疫组织化学检测试剂盒及其使用方法和应用

权利要求书

1.一种TIPE3作为诊断标志物在制备胰腺癌相关检测产品中的应用。

2.如权利要求1所述应用，其特征在于，所述胰腺癌相关检测产品包括TIPE3免疫组织化学检测试剂盒；所述TIPE3免疫组织化学检测试剂盒用于判断胰腺癌恶性程度及患者预后情况。

3.一种TIPE3免疫组织化学检测试剂盒，其特征在于，所述TIPE3免疫组织化学检测试剂盒至少包括如下组分：一抗、二抗、灭活组织切片中过氧化物酶和生物素的试剂、与辣根过氧化物酶反应并显色的显色试剂，特异性对组织中细胞核染色的试剂；

其中，一抗具体为针对人TIPE3抗原所制备的TIPE3特异性抗体。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述灭活组织切片中过氧化物酶和生物素的试剂为H₂O₂溶液；

所述与辣根过氧化物酶反应并显色的显色试剂为DBA溶液；

所述特异性对组织中细胞核染色的试剂为苏木素。

5.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述TIPE3免疫组织化学检测试剂盒还包括固定剂、脱蜡水化剂、血清封闭剂、缓冲液、抗体稀释液和脱水透明剂。

6.如权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述固定剂为中性缓冲4％多聚甲醛液、Bouin’s液或mDF液；

所述血清封闭剂是和二抗同一来源的动物自身的血清中抗体，预先能和组织中能够与二抗结合的位点发生结合；或者小牛血清、BSA、羊血清，且不与一抗来源一致；

所述缓冲液是PBS缓冲液；

所述抗体稀释液为PBS，或添加叠氮化钠防腐剂和/或BSA稳定剂的专用抗体稀释液；

所述脱蜡水化剂与脱水透明剂均为二甲苯和乙醇；所述乙醇包括无水乙醇、95％乙醇、85％乙醇和75％乙醇。

7.权利要求3-6任一项所述TIPE3免疫组织化学检测试剂盒用于组织切片免疫组织化学染色诊断的使用方法，所述方法包括：

S1、取待测者待测组织固定后制石蜡片；

S2、经处理后的石蜡片先后与一抗、二抗反应；

S3、反应结束后，对切片进行清洗，经DAB染色、苏木素复染、脱水透明封片，显微镜观察。

8.如权利要求7所述的使用方法，其特征在于，

所述步骤S1中，待测者待测组织为胰腺组织；

所述步骤S2中，所述石蜡片处理过程包括：将制备得到的石蜡片脱蜡水化后，进行抗原修复，然后灭活过氧化物酶和生物素并进行血清封闭；

所述步骤S3中，所述显微镜观察包括：每个样本随机选取三个视野，每组细胞约500个；根据苏木精染色强度进行半定量评分(0，阴性；1，+；2，++；3，+++)，根据阳性细胞的百分数分为四级(1％，0分；1-25％，1分；26-50％，2分；60-75％，3分；76-100％，4分)；将每个样本的两个评分结合，得到最终的TIPE2表达评分；定义表达水平的分界点为：0-3分，低表达；4-8分，高表达。

9.权利要求TIPE3免疫组织化学检测试剂盒和/或使用方法在胰腺癌检测中的应用。

10.如权利要求9所述应用，其特征在于，所述肿瘤检测具体包括：判断胰腺癌恶性程度及患者预后情况。