[发明专利]一种N糖基转移酶突变体F13及其应用有效
申请号: | 202110527726.0 | 申请日: | 2021-05-14 |
公开(公告)号: | CN113249353B | 公开(公告)日: | 2022-03-22 |
发明(设计)人: | 陈敏;李昆;刘昭曦 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
主分类号: | C12N9/10 | 分类号: | C12N9/10;C12P21/02;C12N9/48 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 李健康 |
地址: | 266237 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 糖基转移酶 突变体 f13 及其 应用 | ||
1.一种N糖基转移酶突变体,其特征在于:所述突变体是对NCBI Reference Sequence:WP_005605627.1的来源于胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae)中的N-糖基转移酶基因经过N471I、S275A、P497R三点突变获得;所述突变体命名为N糖基转移酶突变体F13,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,该突变体相较野生型NGT糖基化效率和底物范围显著提高,能够广泛糖基化野生型NGT不能糖基化的片段并且能够利用野生型不能利用的糖供体UDP-GlcA。
2.权利要求1所述N糖基转移酶突变体作为微生物体内多肽糖基化修饰的工具酶在利用UDP-Glc或UDP-Gal或UDP-GlcA将含有N-X-S/T序列的多肽进行糖基化形成糖肽中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于:所述N糖基转移酶突变体F13作为工具酶相较野生型NGT糖基化效率和底物识别范围显著提升,能将UDP-Glc或UDP-Gal或UDP-GlcA上的Glc/Gal/GlcA转移至广泛的含N-X-S/T序列的多肽,形成糖肽;进一步利用其他的糖基转移酶对糖肽的糖链进行修饰能用于生产带有糖基化修饰的药物蛋白。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述药物蛋白是抗体、细胞因子或糖蛋白疫苗。
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