[发明专利]一种假型化病毒载体颗粒

权利要求书

1.一种用于将生物材料转移到细胞中的假型化病毒载体颗粒，其中所述载体颗粒至少包含：

(1)嵌合包膜糖蛋白，其包含由长臂猿内源性白血病病毒(GalV)包膜糖蛋白的胞外结构域和跨膜结构域与鼠白血病病毒(MLV)包膜糖蛋白的胞质尾结构域的融合体组成,其中胞质尾结构域缺乏融合抑制性R肽，所述GalV的胞外结构域如SEQ ID NO:1所示，所述GalV的跨膜结构域如SEQ ID NO:2所示，所述MLV的胞质尾结构域如SEQ ID NO:5所示，所述融合抑制性R肽的序列包括SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6；或

(2)修饰的GalV包膜糖蛋白，其包括长臂猿内源性白血病病毒(GalV)的胞外和跨膜结构域，所述胞外结构域如SEQ ID NO:1所述，所述跨膜结构域如SEQ ID NO:2所示，所述包膜糖蛋白的胞质尾结构域如SEQ ID NO:7所述，并且胞质尾结构域缺乏融合抑制性R肽，所述融合抑制性R肽的序列包括SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:6。

2.根据权利要求1所述的假型化病毒载体颗粒，其是慢病毒载体颗粒。

3.根据权利要求2所述的慢病毒载体颗粒，其选自HIV或SIV。

4.根据权利要求1所述的生物材料，其是一种或多种核酸。

5.根据权利要求1所述的假型化病毒载体颗粒，其可能包含或表达其他外源核酸。

6.根据权利要求1-5任一项所述的假型化病毒载体颗粒，其被用于将生物材料转移入造血细胞或免疫淋巴细胞。

7.根据权利要求1-5任一项所述的假型化病毒载体颗粒，其被用于治疗造血功能障碍或自身免疫性疾病或免疫细胞治疗血液瘤和实体瘤。

8.根据权利要求7所述的造血功能障碍，其包含范可尼贫血、血友病、β-地中海贫血、Wiskott-Aldrich综合症、X-连锁重症联合免疫缺陷、腺苷脱氨酶缺乏症、慢性肉芽肿病和肾上腺脑白质营养不良。

9.一种用于产生假型化病毒载体颗粒的方法，其包括

a)用以下物质转染细胞以得到生产细胞：

(i)至少一种第一核酸序列，包含具有包装能力的慢病毒衍生的基因组，如人免疫缺陷病毒(HIV)，例如HIV-1或HIV-2、猴免疫缺陷病毒(SIV)、猫免疫缺陷病毒(FIV)、马感染性贫血病毒(EIAV)和山羊关节炎脑炎病毒(CAEV)载体颗粒；和

(ii)至少一种第二核酸序列，包含编码来自所述逆转录病毒的核心蛋白的cDNA，如由gag蛋白结合构成的核心组分，和酶组分(pro,pol)；和

(iii)至少一种第三核酸序列(SEQ ID NO:8；SEQ ID NO:9)，包含编码以下蛋白的cDNA：

-嵌合包膜糖蛋白，其包含由长臂猿内源性白血病病毒(GalV)包膜糖蛋白的胞外结构域和跨膜结构域与鼠白血病病毒(MLV)包膜糖蛋白的胞质尾结构域的融合体组成,其中胞质尾结构域缺乏融合抑制性R肽，所述GalV的胞外结构域如SEQ ID NO:1所示，所述GalV的跨膜结构域如SEQ ID NO:2所示，所述MLV的胞质尾结构域如SEQ ID NO:5所示，所述融合抑制性R肽的序列包括SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:6；或

-修饰的GalV包膜糖蛋白，胞外和跨膜结构域是长臂猿内源性白血病病毒(GalV)包膜糖蛋白的胞外结构域和跨膜结构域，所述胞外结构域如SEQ ID NO:1所述，所述跨膜结构域如SEQ ID NO:2所示，所述包膜糖蛋白的胞质尾结构域如SEQ ID NO:7所述，并且胞质尾结构域缺乏融合抑制性R肽，所述融合抑制性R肽的序列包括SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:6

b)将所述生产细胞在培养物中维持足够时间，以允许表达cDNA产生编码蛋白；和

c)允许编码蛋白形成假型化病毒载体颗粒。