[发明专利]一种利用超滤法自初乳中获取乳铁蛋白的方法在审
| 申请号: | 202110523613.3 | 申请日: | 2021-05-13 |
| 公开(公告)号: | CN113278063A | 公开(公告)日: | 2021-08-20 |
| 发明(设计)人: | 徐明;孙兆贵 | 申请(专利权)人: | 上海仁统生物科技中心 |
| 主分类号: | C07K14/79 | 分类号: | C07K14/79;C07K1/34 |
| 代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 王敏 |
| 地址: | 200032 上海市徐*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 利用 超滤 初乳 获取 铁蛋白 方法 | ||
1.一种利用超滤法自初乳中获取乳铁蛋白的方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)脱脂:将初乳离心,弃去上层脂肪,收集脱脂乳;
(2)酸沉淀法获取乳清蛋白样品;将脱脂乳pH调节至4.6;
(3)二次超滤纯化乳铁蛋白:
①先将乳清蛋白样品用生理盐水冲洗,获得混合液;再将混合液pH调至6.8-7.4;用截留90-120kDa分子量的滤膜过滤混合液,获得一次滤液;生理盐水添加量为乳清蛋白样品体积的0.5-3.0倍,膜两侧压力差参数0.04-0.15Mpa;
②将一次滤液用生理盐水冲洗,获得混合液,再将混合液pH调至7.0-8.5,再经过截留分子量为60-80KDa的滤膜过滤,得到经过浓缩的截留液;生理盐水添加量为一次滤液体积的0.5-2.0倍,膜两侧压力差参数0.04-0.10Mpa;
(4)乳铁蛋白冷冻干燥:将经过浓缩的截留液,用冷冻干燥机在-40℃~10℃条件下干燥,获得乳铁蛋白。
2.根据权利要求1所述的一种利用超滤法自初乳中获取乳铁蛋白的方法,其特征在于,步骤(1)所述离心条件为4℃条件下3000-5000r/min离心15-20min。
3.根据权利要求1所述的一种利用超滤法自初乳中获取乳铁蛋白的方法,其特征在于,步骤(2)所述酸沉淀法获取乳清蛋白样品的具体步骤如下:将脱脂乳用1mol/L HCl调节pH至4.6,于4℃条件下5000r/min离心20min,收集上清液,即为酸沉淀法所得乳清蛋白样品。
4.根据权利要求1所述的一种利用超滤法自初乳中获取乳铁蛋白的方法,其特征在于,步骤(3)中①用截留100kDa分子量的滤膜过滤混合液,获得一次滤液。
5.根据权利要求1所述的一种利用超滤法自初乳中获取乳铁蛋白的方法,其特征在于,步骤(3)中②用截留分子量为70KDa的滤膜过滤,得到经过浓缩的截留液。
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