[发明专利]检测多特异性抗体轻链错配的方法

权利要求书

1.多特异性抗体的蛋白质水解酶的限制性消化对分析多特异性抗体轻链配对的用途。

2.多特异性抗体的蛋白质水解酶的限制性消化对确定多特异性抗体中轻链错配的用途。

3.重组哺乳动物细胞生产的多特异性抗体的蛋白质水解酶的限制性消化对选择生产多特异性抗体的哺乳动物细胞的用途。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的用途，其中所述蛋白质水解酶选自Lys-C、Asp-N、Arg-C、Glu-C和胰凝乳蛋白酶。

5.根据权利要求4所述的用途，其中蛋白质水解酶是Lys-C。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的用途，其中所述孵育持续35至45分钟。

7.根据权利要求6所述的用途，其中所述孵育持续约40分钟。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的用途，其特征在于，与蛋白质水解酶孵育的多特异性抗体是去糖基化的多特异性抗体。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的用途，其中抗体与酶的重量比为约1：200。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的用途，其中与蛋白质水解酶孵育的多特异性抗体具有从200至600μg/mL的浓度。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的用途，其中所述多特异性抗体是单克隆多特异性抗体。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的用途，其中所述多特异性抗体包含至少两个非肽结合的轻链。

13.根据权利要求1至11中任一项所述的用途，其中所述多特异性抗体包含至少三个非肽结合的多肽。

14.一种用于确定多特异性抗体中轻链配对的方法，所述方法包括以下步骤：

a)将包含多特异性抗体的样本与蛋白质水解酶孵育限定的时间，

b)通过质谱法鉴定由步骤a)的限制性蛋白水解消化获得的片段的质量，和

c)从步骤b)的结果确定多特异性抗体的轻链配对。

15.一种用于确定多特异性抗体的轻链错配的方法，所述方法包括以下步骤：

a)将包含多特异性抗体的样本与蛋白质水解酶孵育限定的时间，

b)通过质谱法鉴定由步骤a)的限制性蛋白水解消化获得的片段的质量，和

c)从步骤b)的结果确定多特异性抗体的轻链配对，从而确定轻链错配。

16.一种用于选择生产多特异性抗体的重组哺乳动物细胞的方法，所述方法包括以下步骤：

a)将包含一组重组哺乳动物细胞的一个重组哺乳动物细胞克隆群生产的多特异性抗体的样本单独地与蛋白质水解酶孵育限定的时间，所述一组重组哺乳动物细胞的所有细胞生成相同的多特异性抗体，

b)通过质谱法鉴定由步骤a)的限制性蛋白水解消化获得的片段的质量，和

c)从步骤b)的结果确定每个克隆细胞群的多特异性抗体的轻链错配的存在，和

d)基于步骤c)的结果选择生产多特异性抗体的重组细胞。

17.根据权利要求14至16中任一项所述的方法，其中蛋白质水解酶选自Lys-C、Asp-N、Arg-C、Glu-C和胰凝乳蛋白酶。

18.根据权利要求17所述的方法，其中蛋白质水解酶是Lys-C。

19.根据权利要求14至18中任一项所述的方法，其中所述孵育持续35至45分钟。