[发明专利]细胞微颗粒在治疗呼吸道病毒性肺炎上的应用

权利要求书

1.一种肿瘤细胞来源的微颗粒，其包含凋亡的肿瘤细胞所释放的细胞囊泡，所述细胞囊泡在其表面表达刺突蛋白结合受体；

优选地，所述刺突蛋白是肺炎病毒刺突蛋白；

更优选地，所述肺炎病毒选自：SARS-CoV、SARS-CoV-2、或其变体；

最优选地，所述刺突蛋白结合受体是血管紧张素转换酶2(ACE2)或其结合片段；

所述肿瘤细胞是肺癌细胞或结肠癌细胞。

2.根据权利要求1所述的肿瘤细胞来源的微颗粒，其中：

优选地，所述肺癌细胞选自：NCI-H196、NCI-H292、NCI-H460、NCI-H446、NCI-H1299、NCI-H1650、H1792、NCI-H3255、A427、A549、0225-02Sp、2F7、95-D、SPCA-1、LLC、Calu-1、Calu-3、L1022、PC9R、MSTO-211H、TKB-1；更优选，Calu-3、A549；

优选地，所述结肠癌细胞选自：HCT116、HCT116/FU、HCT-8/FU、LoVo、LoVo ADR、SW480、SW620、CaCo-2、RKO-E6、RKO-AS45-1、FET、HT55、HT115、HT-29、COLO 205、KM12、CL-40、KM12-SM、COLO320DM、NCI-H508、SW1417、COLO394、WiDr；更优选，Caco-2。

3.根据权利要求1所述的肿瘤细胞来源的微颗粒，所述细胞囊泡的平均粒径为200nm至800nm，优选300nm、400nm、500nm、600nm、700nm。

4.一种制备肿瘤细胞来源的微颗粒的方法，包括步骤：

1)提供表达刺突蛋白结合受体的肿瘤细胞；

2)使步骤1)的所述肿瘤细胞凋亡；

优选地，通过选自以下任一项的方式使步骤1)的所述肿瘤细胞凋亡：紫外线照射、X射线照射、化疗药物；

3)收集凋亡的肿瘤细胞所释放的细胞囊泡；优选地，通过离心收集凋亡的肿瘤细胞所释放的细胞囊泡，所述细胞囊泡的平均粒径为200nm至800nm，优选300nm、400nm、500nm、600nm、700nm。

5.根据权利要求4所述的方法，其中：

所述刺突蛋白是肺炎病毒刺突蛋白；

所述肺炎病毒选自：SARS-CoV、SARS-CoV-2、或其变体；

优选地，所述刺突蛋白结合受体是ACE2或其结合片段；

所述肿瘤细胞选自：肺癌细胞、结肠癌细胞；

所述肺癌细胞选自：NCI-H196、NCI-H292、NCI-H460、NCI-H446、NCI-H1299、NCI-H1650、H1792、NCI-H3255、A427、A549、0225-02Sp、2F7、95-D、SPCA-1、LLC、Calu-1、Calu-3、L1022、PC9R、MSTO-211H、TKB-1；更优选，Calu-3、A549；

优选地，所述结肠癌细胞选自：HCT116、HCT116/FU、HCT-8/FU、LoVo、LoVo ADR、SW480、SW620、CaCo-2、RKO-E6、RKO-AS45-1、FET、HT55、HT115、HT-29、COLO 205、KM12、CL-40、KM12-SM、COLO320DM、NCI-H508、SW1417、COLO394、WiDr；更优选，Caco-2。

6.根据权利要求4所述的方法，其中，步骤3)中，通过以下方式收集细胞囊泡，包括步骤：

在2至8C°，以800至1000g对步骤2)所得凋亡的肿瘤细胞离心5至15分钟，以去除完整细胞，得到第一产物；

在2至8C°，以12000至15000g对第一产物离心1至3分钟，以去除细胞碎片，得到第二产物；

在2至8C°，以12000至15000g对第二产物离心40至80分钟，以收集释放的细胞囊泡。

7.一种肿瘤细胞来源的微颗粒，其是通过权利要求4至6中任一项所述的方法制备所得。