[发明专利]一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法及用途

说明书

本说明书一个或多个实施例提供一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法及用途，将白扁豆花除杂洗净干燥后粉碎，提取及初富集，AB‑8大孔树脂柱分离获得Fr.II，再经半制备高效液相色谱法(semi‑preparative HPLC)纯化，C18柱、乙腈和0.5％的乙酸‑水的流动相的梯度洗脱，收集各峰流出物，获得具有清除自由基、抑制α‑葡萄糖苷酶的活性的7个白扁豆花黄酮化合物，能用于药品、保健营养品的原料或添加剂。本发明制备的白扁豆花黄酮化合物，具有抗氧化、降血糖活性，制备方法简单，安全好，白扁豆花原料资源丰富，具有良好的开发应用前景。

技术领域

本说明书一个或多个实施例涉及白扁豆花黄酮的分离提纯技术领域，尤其涉及一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法及用途。

背景技术

白扁豆为药食两用植物，又名扁豆，沿篱豆，蛾眉豆，系豆科植物扁豆Dolichoslablab L成熟种子。在我国大部分地区都有栽培。白扁豆花为扁豆属植物的干燥花。现代药理研究表明，白扁豆花具有消暑，化湿之功效。

体内自由基过多，可导致细胞和组织器官损伤、诱发各种疾病、加速机体衰老等。黄酮类化合物是一类广泛存在于植物界的重要的生物活性物质，现代医学研究表明，黄酮类化合物具有抗氧化、抗衰老、清除自由基、抗病毒、抗肿瘤、抑菌、保护心脑血管、调节免疫等方面的作用。随着人们生活水平的提高，工作节奏的加快，饮食结构的改变，我国患有糖尿病和高血脂症者日渐增多。长期服用治疗药物，多会产生各种不同程度的副作用。因此，从天然产物中寻找抗氧化、降血糖活性成分，或将其主结构作为先导化合物进而研发新药，或开发功能性食品，具有毒性小、研发费用低、周期短和全民保健的优势。

发明人在研究植物成分的提取过程中发现白扁豆花黄酮成分具有不同于其他植物黄酮成分的性质，在提取过程中现有的植物成分的提取、纯化的方法，无法适用于白扁豆花黄酮成分的提取、纯化，采用现有的提取方法，获取的白扁豆花黄酮成分的生物活性很低，导致无法进行白扁豆花黄酮成分的生物活性的研究。

发明内容

有鉴于此，本说明书一个或多个实施例的目的在于提出一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法及用途，以解决现有技术中白扁豆花黄酮类化合物分离提纯存在的技术壁垒问题。

基于上述目的，本说明书一个或多个实施例提供了一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法，包括如下步骤：

粉碎：将白扁豆花进行烘干，然后用粉碎机粉粹，过筛，得白扁豆花粉；

提取及初富集：用乙醇对白扁豆花粉进行回流萃取，然后用石油醚洗涤萃取液并收集下层水相，石油醚洗涤萃取液具有除去鞣制、皂苷类杂质，然后对收集的水相进行旋转蒸发，并用正丁醇萃取富集黄酮类化合物，对提取的黄酮类化合物减压旋转蒸发至浸膏；

分离：将浸膏复溶于水中，用不同浓度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集洗脱液，依次对洗脱液进行减压旋蒸发、冷冻干燥，得白扁豆花黄酮类化合物组分Fr.Ⅰ、Fr.Ⅱ、Fr.Ⅲ和Fr.Ⅳ；

纯化：取组分Fr.Ⅱ，用甲醇溶解，采用半制备高效液相色谱法进行白扁豆花黄酮类化合物提纯，得纯白扁豆花黄酮类化合物。

可选的，所述半制备高效液相色谱法包含如下工艺参数：

色谱柱：Sunfire C18柱，规格为：150mm×10mm I.D.，粒径为：5μm；流动相：乙腈(A)和0.5％的乙酸-水(B)，柱温30℃，双通道波长为280nm和360nm。

可选的，所述半制备高效液相色谱法包含如下操作步骤：

梯度洗脱：0～5min采用10～17％乙腈溶液进行洗脱，5～10min采用17～19％乙腈溶液进行洗脱，10～25min采用19～26％乙腈溶液进行洗脱，25～26min采用26～10％乙腈溶液进行洗脱，26～28min采用10～10％乙腈溶液进行洗涤；