[发明专利]一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法及用途

权利要求书

1.一种白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

粉碎：将白扁豆花进行烘干，然后用粉碎机粉粹，过筛，得白扁豆花粉；

提取及初富集：用乙醇对白扁豆花粉进行回流萃取，然后用石油醚洗涤萃取液并收集下层水相，然后对收集的水相进行旋转蒸发，并用正丁醇萃取富集黄酮类化合物，对提取的黄酮类化合物减压旋转蒸发至浸膏；

分离：将浸膏复溶于水中，用不同梯度的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集洗脱液，依次对洗脱液进行减压旋蒸发、冷冻干燥，得白扁豆花黄酮类化合物组分Fr.Ⅰ、Fr.Ⅱ、Fr.Ⅲ和Fr.Ⅳ；

纯化：取组分Fr.Ⅱ，用甲醇溶解，采用半制备高效液相色谱法进行提纯，得纯白扁豆花黄酮类化合物。

2.根据权利要求1所述的白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法，其特征在于，所述半制备高效液相色谱法包含如下工艺参数：

色谱柱：Sunfire C18柱，规格为：150mm×10mm I.D.，粒径为：5μm；流动相：乙腈(A)和0.5％的乙酸-水(B)，柱温30℃，双通道波长为280nm和360nm。

3.根据权利要求1所述的白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法，其特征在于，所述半制备高效液相色谱法包含如下操作步骤：

梯度洗脱：0～5min采用10～17％乙腈溶液进行洗脱，5～10min采用17～19％乙腈溶液进行洗脱，10～25min采用19～26％乙腈溶液进行洗脱，25～26min采用26～10％乙腈溶液进行洗脱，26～28min采用10～10％乙腈溶液进行洗涤；

添加0.5％的乙酸水溶液至流动相中，检测并收集各流出物洗脱峰，得到保留时间Rt为11.732min、12.117min、13.345min、13.991min、15.361min、16.187min和16.531min 7个洗脱峰，然后减压旋转蒸发冻干，得到7个纯化白扁豆花黄酮化合物。

4.根据权利要求1所述的白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法，其特征在于，所述提取及初富集中乙醇的浓度为70％，温度为35℃。

5.根据权利要求1所述的白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法，其特征在于，所述分离中梯度洗脱的材料为AB-8大孔树脂柱，乙醇水溶液的浓度依次为20％、30％、50％和70％。

6.根据权利要求5所述的白扁豆花黄酮类化合物分离制备方法，其特征在于，所述分离中乙醇水溶液的用量为10BV，流速为5mL/min。

7.一种白扁豆花黄酮类化合物，其特征在于，采用权利要求1～6任一所述的制备方法制备而成。

8.根据权利要求7所述的白扁豆花黄酮类化合物，其特征在于，所述白扁豆花黄酮类化合物具有清除ABTS⁺·、DPPH·DPPH·和对α-葡萄糖苷酶体外抑制活性的作用。

9.根据权利要求7所述的白扁豆花黄酮类化合物，其特征在于，所述白扁豆花黄酮类化合物应用在功能性食品中。

10.根据权利要求7所述的白扁豆花黄酮类化合物，其特征在于，所述白扁豆花黄酮类化合物具有抗氧化、降血糖作用。