[发明专利]一种临床前类风湿关节炎(Pre-RA)小鼠模型

权利要求书

1.一种临床前类风湿关节炎(Pre-RA)小鼠模型，其特征在于，通过制作Ⅱ型胶原乳化剂，在小鼠尾根部注射皮丘，使Ⅱ型胶原乳化剂通过毛细血管吸收后，与小鼠全身免疫发生作用，形成具有临床前类风湿关节炎特点的小鼠。

2.根据权利要求1所述的小鼠，其特征在于，所述小鼠选取8-9周，雄性，SPF级，小鼠，其自身免疫较强，其特征实验性结核杆菌的易感性强、MHC H2基因位点突变、常应用II型胶原可以诱导强烈的自身免疫性反应，导致严重的多关节的炎症，表现为滑膜炎、软骨和骨的损伤，模拟类风湿关节炎。

3.根据权利要求1所述的Ⅱ型胶原乳化剂，其特征在于，所述乳化剂依据市场现有的胶原乳化剂和现有文献，对原本4mgⅡ型胶原+含4mg/ml结核杆菌的完全弗氏佐剂，4mgⅡ型胶原+含0mg/ml结核杆菌的不完全弗氏佐剂，

改为2-4mgⅡ型胶原+含2.5mg/ml结核杆菌的完全弗氏佐剂，2-4mgⅡ型胶原+含0mg/ml结核杆菌的不完全弗氏佐剂，

第28天可取5μl 外周血血（耳血或尾血）测量IgM，可判断模型是否成功，

或用10-20ugLPS腹腔注射，检验小鼠模型，

10-20ugLPS腹腔注射后，小鼠可迅速出现关节炎模型，正常BDA/1小鼠10-20ugLPS腹腔注射不可致关节炎。

4.根据权利要求3所述的造模，其特征在于，所述实验步骤在超声下乳化5min±，待完全乳化后，用水检验后，第0天尾根部注射2-4mgⅡ型胶原+含2.5mg/ml结核杆菌的完全弗氏佐剂，第21天尾根部注射2-4mgⅡ型胶原+含0mg/ml结核杆菌的不完全弗氏佐剂。

5.根据权利要求3所述的乳化过程，其特征在于，所述乳化采用水域超声乳化，其参数为 Power 30%，Working 3s，Pause 3s, Total Time 5 min±。

6.根据权利要求3所述的以乳化剂完全乳化，其特征在于，所述乳化剂在权力5所述的步骤下完成，

完成后用1μl 移液枪吸取1μl 置于水中，若见乳剂迅速化开，则继续乳化；若乳剂聚团不散开，则为成功乳剂。

7.根据权利要求2所述的临床前小鼠特点，其特征在于，所述模型特点可见单关节或少关节肿胀，小鼠体重下降，关节软骨和骨侵蚀，Th1/2/17、TfH升高，关节可见少量滑膜增生，小鼠促炎因子IL-1β、TNFα、IL-6、IL-17A升高。