[发明专利]基于荧光定量PCR技术的新冠病毒新型核酸突变检测技术及其应用

权利要求书

1.一种基于荧光定量PCR技术的新冠病毒新型核酸突变基因类型检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括以下两组引物和探针，每个所述探针的两端分别标记有荧光报告基团/荧光淬灭基团：

a.用于检测S基因突变类型：序列位置23012，序列变化GC的引物和探针；其中所述引物包括核苷酸序列分别如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2所示的多核苷酸，其中所述探针的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；

b.用于检测S基因突变类型：序列位置22917，序列变化TG的引物和探针；其中所述引物包括核苷酸序列分别如SEQ ID No.6、SEQ ID No.7所示的多核苷酸，其中所述探针的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还含有用于检测内参基因的引物和探针。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述用于检测内参基因的引物的核苷酸序列分别如SEQ ID No.9和SEQ ID No.10所示；用于检测内参基因的所述探针的核苷酸序列如SEQ ID No.11所示，所述探针的两端分别标记有荧光报告基团/荧光淬灭基团。

4.根据权利要求1或3所述的试剂盒，其特征在于，所述荧光报告基团/荧光淬灭基团选自FAM、VIC或HEX、ROX、NED、CY3或CY5荧光报告基团BHQ1、BHQ2、BHQ3、Dabcy1、Tamra和Quencher基团且试剂盒中各个所述探针上荧光报告基团互不相同。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括以下组分中的任一种或几种：PCR反应液、酶混合液、阳性对照、阴性对照。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述PCR反应液包括缓冲液、MgCl2、dUTP和dNTPs；所述酶混合液包括Taq酶、反转录酶和UNG酶。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述阳性对照选自以下以下任一中或几种：含有部分新冠病毒的S基因序列的假病毒或含有新冠病毒突变序列的假病毒。

8.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述阴性对照为无菌水。

9.如权利要求1-8任一项所述试剂盒用于检测以下任一种或两种新冠病毒核酸S基因突变类型中的用途：a.S基因突变类型：序列位置23012，序列变化GC；b.S基因突变类型：序列位置22917，序列变化TG。

10.如权利要求1-8任一项所述试剂盒在制备检测以下任一种或两种新冠病毒核酸S基因突变类型的产品中的用途：a.S基因突变类型：序列位置23012，序列变化GC；b.S基因突变类型：序列位置22917，序列变化TG。