[发明专利]一种用于检测血清中VEGF含量的抗体对及其用途

说明书

本申请提供一种用于检测血清中VEGF含量的抗体对及其用途，包括与VEGF的N端表位即SEQ I D NO:2所示氨基酸序列相结合的单克隆抗体Ant iVEGF_N和与VEGF的C端表位即SEQ I D NO:3所示氨基酸序列相结合的单克隆抗体Ant iVEGF_C，所述单克隆抗体Ant iVEGF_N包括SEQ I D NO:7所示氨基酸序列的轻链可变区和SEQ I D NO:11所示氨基酸序列的重链可变区，所述Ant iVEGF_C包括SEQ I D NO:17所示氨基酸序列的轻链可变区和SEQ I DNO:21所示氨基酸序列的重链可变区。本申请将VEGF抗原分成N端(SEQ I DNO:2)和C端(SEQ I D NO:3)两段序列，并用这两段序列分别免疫小鼠，筛选到高特异性和高灵敏性的抗体对Ant iVEGF_N和Ant iVEGF_C，通过该抗体对可以有效的测定血清中VEGF的含量，进而便于肿瘤广谱及早期筛查，大大提高了肿瘤早期筛查的准确性。

技术领域

本申请涉及医药领域，尤其涉及一种用于检测血清中VEGF含量的抗体对及其用途。

背景技术

血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth Factor，VEGF)是一种具有高度生物活性的功能性糖蛋白。它是特异性的、生理作用强大的内皮细胞有丝分裂原，能作用于血管内皮细胞，使其增殖、迁移、管腔形成，参与血管生成并使毛细血管通透性增加；它可导致肿瘤血管异常生长，阻碍抗肿瘤药物有效输送至肿瘤组织内，并可刺激新生血管生长因子增加。

VEGF最早在1983年由Senger等[Senger DR,PerruzziCA,FederJ.A highlyconserved vascular permeability factor secreted by a variety of human androdent tumor celllines[J].CancerRes，1986，46(11)：5629-5632.]发现，由两条8个外显子和7个内含子组成的23kD的单链蛋白构成。1994年，Kondo[Kondo S，A sano M，M atsuoK，et a1.Vascular endothelia l growth fac—tor/vascu l ar perm eability factoris d etectable in the sera of tum or—bearing m ice and cancer patients[J].Biochim Biophys Acta，1994，1221(2)：211—214.]等人首次报道了癌症病人血清VEGF水平高于正常对照，从而开始了VEGF血液(包括血清和血浆)含量与肿瘤的发生、发展、以及治疗过程中VEGF的变化的实验性临床研究并获得了大量的研究资料。VEGF近些年被作为一种能反应肿瘤发生发展变化的物质，研究较为广泛。在检索英文280余篇，中文230余篇的VEGF相关文献中，95％以上的文献证实了肿瘤病人血清VEGF水平增高的事实。肿瘤类型几乎涵盖了目前临床大部分实体肿瘤和部分非实体肿瘤。VEGF血液水平不仅在肿瘤各期均增加，而且在其早期0-1期即增加，常规肿瘤标志物只有4期癌症和正常对照才有显著性差异。VEGF被认为是目前肿瘤广谱及早期筛查最有意义的标记物。由于VEGF的抗原较大，抗原制备的难度较大，同时，截止目前，还没有针对VEGF临床检测的配对抗体报道。

发明内容

本申请为解决上述技术问题而提供一种用于检测血清中VEGF含量的抗体对及其用途。

本申请所采取的技术方案是：本申请第一方面提供一种用于检测血清中VEGF含量的抗体对，其特征在于：包括与VEGF的N端表位即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列相结合的单克隆抗体AntiVEGF_N和与VEGF的C端表位即SEQ ID NO:3所示氨基酸序列相结合的单克隆抗体AntiVEGF_C，所述单克隆抗体AntiVEGF_N包括SEQ ID NO:7所示氨基酸序列的轻链可变区和SEQ ID NO:11所示氨基酸序列的重链可变区，所述AntiVEGF_C包括SEQ ID NO:17所示氨基酸序列的轻链可变区和SEQ ID NO:21所示氨基酸序列的重链可变区。