[发明专利]诱导干细胞分化为视网膜色素上皮细胞的方法在审
| 申请号： | 202110493801.6 | 申请日： | 2021-05-07 |
| 公开（公告）号： | CN115305239A | 公开（公告）日： | 2022-11-08 |
| 发明（设计）人： | 张凡;曾露颖;乔静;陈邵宏;赵宇 | 申请（专利权）人： | 北京中因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/079 | 分类号： | C12N5/079 |
| 代理公司： | 上海巅石知识产权代理事务所(普通合伙) 31309 | 代理人： | 蒋舫玮;张琤 |
| 地址： | 102206 北京市昌平区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 诱导 干细胞 化为 视网膜 色素 上皮细胞 方法 | ||
1.一种诱导干细胞分化为视网膜色素上皮细胞(RPE)的方法，其包括以下步骤：
在干细胞经细胞培养出现细胞状态衰退前，将所述干细胞置于第一培养基中培养，其中所述第一培养基包含DMEM培养基、血清、β-巯基乙醇、非必需氨基酸(NEAA)和L-谷氨酰胺。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一培养基包含DMEM培养基、血清、β-巯基乙醇、非必需氨基酸(NEAA)和GlutaMAXTM。
3.根据权利要求1-2中任一项所述的方法，其中DMEM培养基包含KnockOutTMDMEM和/或DMEM/F-12。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中在所述第一培养基中，所述血清的浓度为约10％(v/v)-约30％(v/v)。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中在所述第一培养基中，所述β-巯基乙醇的浓度为0.1％(v/v)-约1％(v/v)。
6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中在所述第一培养基中，所述NEAA的浓度为0.5％(v/v)-约2％(v/v)。
7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中在所述第一培养基中，所述L-谷氨酰胺的浓度为0.5％(v/v)-约2％(v/v)。
8.根据权利要求2-7中任一项所述的方法，其中在所述第一培养基中，所述GlutaMAXTM的浓度为0.5％(v/v)-约2％(v/v)。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述干细胞在所述第一培养基中培养约5-约15天。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述细胞状态衰退包含至少约20％数量的细胞出现选自下组的状态：细胞皱缩、细胞脱落和细胞凋亡。
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