[发明专利]一种美藤果的分段酶解工艺及其制备的美藤果肽

说明书

本发明公开了一种美藤果的分段酶解工艺及其制备的美藤果肽，属于活性肽生产技术领域，该美藤果的分段酶解工艺包括原料预处理、高温处理、蛋白酶解、二次酶解、灭酶活、浓缩干燥步骤。本发明操作简单，处理条件温和，多肽得率高，采用高温蒸煮结合酶解得方法对美藤果蛋白进行水解，高温使得蛋白空间结构发生变化，空间结构松散，更容易被蛋白酶水解，多肽得率明显提高，按照本发明的方法制得的美藤果肽分子量低且均一，纯度较高，能够快速穿过人体口腔和胃，直接进入小肠，能更好地被人体消化吸收，而且具有显著清除自由基的功效，可作为一种天然的抗氧化剂应用到保健品领域。

技术领域

本发明属于活性肽生产技术领域，涉及一种美藤果的分段酶解工艺及其制备的美藤果肽。

背景技术

美藤果学名南美油藤，为大戟科美藤果属的多年生木质藤本植物。目前主要种植于缅甸、老挝及我国云南普洱、西双版纳等多个国家和地区，且种植规模正在逐渐扩大。目前美藤果种子主要用于油脂的提取，随之会产生大量的饼粕。美藤果种仁含蛋白27％，其含量仅次于大豆，饼粕中蛋白含量为60％以上。研究发现美藤果蛋白营养价值较高，是一种优质的植物蛋白来源，富含9种人体必需的氨基酸。随着人们生活水平的不断提高，对植物蛋白的需求量也越来越大，植物蛋白不仅可作为食品添加剂，也可作为营养成分补充人体所需的蛋白质。蛋白质由于其分子量大且结构复杂，摄入人体后不易被消化吸收，从而影响了其生理功能和营养价值的有效发挥。

近年来，生物活性肽在生物体内所发挥的生理功能受到越来越多的重视。生物活性肽与蛋白质相比，具有结构简单分子量小的特点，生物活性肽不仅能为机体提供营养，还具有调节植物神经系统、活化细胞免疫机能、改善心血管功能、抗衰老等多种生理活性功能。氧化与人类的癌症、老化、动脉硬化等多种疾病相关，适当摄入具有抗氧化活性的物质可以降低体内自由基水平，防止脂质过氧化，帮助机体抵御疾病，对于预防和治疗心血管、糖尿病、癌症、衰老等慢性病有一定的疗效。现有技术中采用酶解法制备蛋白肽较普遍，但也存在多肽得率不高、生物活性较差等缺点。因此，通过蛋白质的可控酶解技术制备得率高、生物活性强的天然抗氧化肽，对于研究开发生物活性肽类抗氧化食品、保健品具有十分重要的科学意义和应用前景。

专利CN111961125A提出了一种美藤果免疫活性肽的制备方法，该方法先采用超声及透析的方法得到美藤果清蛋白，后采用超滤和分离纯化制备而得到，虽小分子肽的得率较高，但操作麻烦。专利CN110066844A一种具有降尿酸功效的美藤果粕生物活性肽的制备方法中也提出了一种美藤果活性肽的制备方法，该方法需要乳酸芽孢杆菌进行发酵，操作复杂，时间较长，发酵过程难以控制。因此为解决现实中美藤果生物活性肽制备过程复杂的问题，本专利提出一种分级酶解工艺制备美藤果生物活性肽的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种操作简单，处理条件温和，多肽得率高的分级酶解工艺制备美藤果生物活性肽的方法。

本发明通过以下技术方案来实现上述目的：

一种美藤果的分段酶解工艺，包括如下步骤：

S1、原料预处理：对美藤果饼粕进行粉碎，然后过筛，得美藤果粕粉备用；

S2、高温处理：将美藤果粕粉按料液比1：10-1：40加入纯净水，于90℃-100℃水浴锅中加热，并保温3-6h；

S3、蛋白酶解：美藤果蛋白高温变性后，将其取出冷却至50℃左右，加入0.5％-1.0％碱性蛋白酶，于pH8.5-10,温度为50℃-70℃下酶解2-6h，酶解完成后进行离心，收集溶液A；

S4、二次酶解：于沉淀物中按料液比1：5-1:20加入纯净水，加入0.1％-0.5％中性蛋白酶，于pH5-8,温度为40℃-60℃下酶解2-6h，酶解完成后进行离心，收集溶液B；

S5、灭酶活：合并溶液A和溶液B，于95℃-100℃下灭酶15-20min，即得美藤果肽溶液；