[发明专利]一种从人胎盘血中提取抗氧化多肽的方法

说明书

本发明公开了一种从人胎盘血中提取抗氧化多肽的方法，其包括如下步骤：(1)原料检测筛选；(2)收集胎盘血和冲洗水；(3)对收集的胎盘血和冲洗水进行病原微生物灭活处理；(4)经病原微生物灭活处理后的液体进行冻融处理；(5)冻融处理后物料进行酶解；(6)酶解液离心分离、过滤、除菌获得小分子多肽无菌溶液。本发明将胎盘中的血液经挤压冲洗收集用于多肽的提取，充分利用胎盘的蛋白资源，实现了胎盘利用的最大化；本发明方法可以提取小分子多肽产物，制备得到的小分子多肽具有很好的抗氧化功能。

技术领域：

本发明涉及一种多肽的提取方法，特别是涉及一种从人胎盘血中提取具有抗氧化能力的多肽的方法。

背景技术：

胎盘多肽是二十一世纪生命科学的革新产品，它是利用现代高科技手段从胎盘中提取的人体需要、也适合人体吸收的生物产品，同时具备缓解疾病和调节人体机能、补充各种生物营养物质、预防疾病发生的多种功效。无论是在临床应用，还是在美容保健等领域，其功效和安全性都是值得认可的。

《本草纲目》称人胎盘为紫河车，提到：紫河车具有“安神养血、补气、益精、补血的作用”，“久服者，耳聪目明，须发黑，延年益寿，有夺造化之功”。紫河车作为药用已有数百年历史，且在不断延伸扩展。胎盘多肽则是从健康产妇胎盘组织液中精致萃取的小分子核酸多肽，含有多种营养素、生长因子及因子等，这些大量的活性成分帮助协调、提高自身免疫力，增强新陈代谢，促进受损细胞和创伤组织的自我修复和愈合；具有抗病毒、抗感染、抗过敏、抗突变、抗肿瘤等缓解及预防保健作用。

胎盘多肽具有广泛的生物学活性，应用于医学美容，其作用全面、效果确切。例如：因其含有大量生长因子，如表皮生长因子，可促进皮肤的新陈代谢；全面的营养素，有效解决皮肤营养不良等问题；其抗感染，抗过敏，能增加细胞功能，增强巨噬细胞活性，具有改善局部营养、生肌、促进切口愈合的作用，尤其对脂肪液化引起的切口障碍，疗效更显著；能够改善更年期症状，提高生活质量等。

常见的胎盘多肽提取都是以胎盘组织为原料，采用高温煮沸，超滤提取等技术提取，制备过程中胎盘中留存的胎盘血被冲洗掉，既会对环境造成污染，又浪费了宝贵的蛋白资源。胎盘血液主要成分为多种蛋白质，含少量脂类、葡萄糖及无机盐等。蛋白质主要是血红蛋白，其次是血清白蛋白、血清球蛋白和少量纤维蛋白。血浆蛋白经酶解后，酶解物组成中含有丰富的肽，其分子量大小不一，功能各异，已经报道的包括增强免疫力、抗高血压、抗菌、抗氧化等功能。

近几年来采用动物血液蛋白源制备生物肽的研究较为活跃，Brant报道从牛血血红蛋白中分离得到两种吗啡肽。任建东等曾报道过在鹿茸血的Alcalase水解物有抗氧化活性和ACE抑制活性作用。刘骞中等人研究了酶水解猪血浆蛋白的工艺条件，获得具有抗氧化活性的猪血浆蛋白肽，但是对人胎盘血提取多肽的研究较少。

公开号为CN103784935A的中国发明专利公开了一种采用超滤技术提取胎盘血中多肽的方法，用反复冻融的方法获得多肽提取液，用截留分子量为10000D的超滤膜超滤多肽提取液，提取的多肽分子量大，抗氧化能力低。

发明内容：

为解决以上技术问题，本发明的目的在于提供一种能够从人胎盘血中提取抗氧化能力强、易吸收的小分子多肽的方法。

本发明的目的由如下技术方案实施：一种从人胎盘血中提取抗氧化多肽的方法，其包括如下步骤：(1)原料检测筛选；(2)收集胎盘血和冲洗水；(3)对收集的胎盘血和冲洗水进行病原微生物灭活处理；(4)经病原微生物灭活处理后的液体进行冻融处理；(5)冻融处理后物料进行酶解；(6)酶解液离心分离、过滤、除菌获得小分子多肽无菌溶液；其中，

所述步骤(5)冻融处理后物料进行酶解的具体操作方法为：检测冻融物料的蛋白浓度，用纯水调节最终底物蛋白浓度为5-8％，调节冻融瓶中物料的pH值到6.0-8.0，按照底物蛋白含量加入碱性蛋白酶为2400-3000U/g，放入气浴恒温摇床中，温度设置成50-55℃，酶解3-5h，得到酶解液。