[发明专利]一种快速检测病毒核酸的方法及其检测装置

说明书

本发明提出一种快速检测病毒核酸的方法及其检测装置，属于病毒检测技术领域，能够解决常规的核酸检测方法存在对环境要求高、检测时间较长、操作难度大，难以实现现场快检等的技术问题。该检测方法包括：擦拭采样、样本裂解处理、检测与显色处理等步骤；该检测装置包括：基体、样本裂解腔、输送装置以及检测与显色腔。本发明具有操作简便、灵敏度高、检测时间短，且能够实现现场快检等特点。本发明能够应用于病毒核酸现场快检方面。

技术领域

本发明属于病毒检测技术领域，尤其涉及一种快速检测病毒核酸的方法及其检测装置。

背景技术

近期国内复发的多起新冠肺炎疫情都是由于国外进口商品携带新冠病毒，进而传染给接触者造成的，而且由于冷链生鲜食品或相关环境中存在病毒载量较低，常规采样和检测方法存在漏检的风险，且常规的核酸检测方法(如PCR法)存在对环境要求高、检测时间较长、操作难度大，难以实现现场快检等缺陷。

然而，我国每天需要进口大量冷链商品和原料，对于进出口口岸、食品生产企业等机构部门而言，急需研发出一种操作简便、灵敏度高、检测时间短，且能够实现现场快检的病毒核酸检测方法，力求把疫情防控在最前线，将传染隐患扼杀在萌芽期。

发明内容

本发明针对常规的核酸检测方法存在对环境要求高、检测时间较长、操作难度大，难以实现现场快检等的技术问题，提出一种具有操作简便、灵敏度高、检测时间短，且能够实现现场快检的检测病毒核酸的方法及其检测装置。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种快速检测病毒核酸的方法，包括如下步骤：

采样膜片于待测样本表面擦拭采样；

将采样后的采样膜片放置于装有裂解液的样本裂解腔中进行裂解处理，得到核酸溶液；

经输送装置将所述核酸溶液分别输送至装有反应试剂的第一检测与显色腔和第二检测与显色腔中进行核酸检测与显色反应；

反应完成后，根据所述第一检测与显色腔和第二检测与显色腔内溶液的颜色变化进行判断，溶液显色或溶液颜色发生明显改变表明所述待测样本中含有待检病毒，其为阳性样本。

作为优选，所述待测样本包括但不限于物品表面、人或动物的口腔。

作为优选，所述裂解液含有蛋白酶K 20-100mg/L、吐温20 0.1％-1％、尿素2％-10％和TritonX-100 0.1％-1％，所述裂解处理的时间为2-10min，核酸检测与显色反应于60-70℃条件下进行，反应时间为20-30min。

作为优选，所述第一检测与显色腔和第二检测与显色腔可分别检测同一种病毒的两段基因片段、同一病毒的两种分型或两种不同的病毒；

第一检测与显色腔的反应试剂包括第一检测试剂和第一显色试剂，第二检测与显色腔内的反应试剂包括第二检测试剂和第二显色试剂。

作为优选，所述第一检测试剂含有引物AF3和AT7B3各0.2-2uM、引物AFIP和ABIP各0.1-1uM、dUTP/dATP/dTTP/dCTP/dGTP 0.2-2uM、ATP/UTP/CTP/GTP 0.02-2uM、MgCl₂ 2-10mM、T7 RNA聚合酶20-2KU/L、Bst DNA聚合酶20-2KU/L、UDG酶1-10K U/L以及显色试剂0.1-1％；

第二检测试剂含有引物BF3和BT7B3各0.2-2uM、引物BFIP和BBIP各0.1-1uM、dUTP/dATP/dTTP/dCTP/dGTP 0.2-2uM、ATP/UTP/CTP/GTP 0.02-2uM、MgCl₂ 2-10mM、T7 RNA聚合酶20-2KU/L、Bst DNA聚合酶20-2KU/L、UDG酶1-10K U/L以及显色试剂0.1-1％。