[发明专利]一种快速检测病毒核酸的方法及其检测装置

权利要求书

1.一种快速检测病毒核酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：

采样膜片于待测样本表面擦拭采样；

将采样后的采样膜片放置于装有裂解液的样本裂解腔中进行裂解处理，得到核酸溶液；

经输送装置将所述核酸溶液分别输送至装有反应试剂的第一检测与显色腔和第二检测与显色腔中进行核酸检测与显色反应；

反应完成后，根据所述第一检测与显色腔和第二检测与显色腔内溶液的颜色变化进行判断，溶液显色或溶液颜色发生明显改变表明所述待测样本中含有待检病毒，其为阳性样本。

2.根据权利要求1所述的快速检测病毒核酸的方法，其特征在于，所述待测样本包括但不限于物品表面、人或动物的口腔。

3.根据权利要求1所述的快速检测病毒核酸的方法，其特征在于，所述裂解液含有蛋白酶K 20-100mg/L、吐温20 0.1％-1％、尿素2％-10％和TritonX-100 0.1％-1％，所述裂解处理的时间为2-10min，核酸检测与显色反应于60-70℃条件下进行，反应时间为20-30min。

4.根据权利要求1所述的快速检测病毒核酸的方法，其特征在于，所述第一检测与显色腔和第二检测与显色腔可分别检测同一种病毒的两段基因片段、同一病毒的两种分型或两种不同的病毒；

所述第一检测与显色腔的反应试剂包括第一检测试剂和第一显色试剂，第二检测与显色腔内的反应试剂包括第二检测试剂和第二显色试剂。

5.根据权利要求4所述的快速检测病毒核酸的方法，其特征在于，所述第一检测试剂含有引物AF3和AT7B3各0.2-2uM、引物AFIP和ABIP各0.1-1uM、dUTP/dATP/dTTP/dCTP/dGTP0.2-2uM、ATP/UTP/CTP/GTP 0.02-2uM、MgCl₂ 2-10mM、T7 RNA聚合酶20-2KU/L、Bst DNA聚合酶20-2KU/L、UDG酶1-10K U/L以及显色试剂0.1-1％；

第二检测试剂含有引物BF3和BT7B3各0.2-2uM、引物BFIP和BBIP各0.1-1uM、dUTP/dATP/dTTP/dCTP/dGTP 0.2-2uM、ATP/UTP/CTP/GTP 0.02-2uM、MgCl₂ 2-10mM、T7 RNA聚合酶20-2KU/L、Bst DNA聚合酶20-2KU/L、UDG酶1-10K U/L以及显色试剂0.1-1％。

6.根据权利要求4所述的快速检测病毒核酸的方法，其特征在于，所述第一显色试剂和第二显色试剂均选自GeneFinder核酸染料、Gelgreen核酸染料、goldview核酸染料或钙黄绿素中的任意一种。

7.根据权利要求5所述的快速检测病毒核酸的方法，其特征在于，所述快速检测病毒核酸的方法的检测病毒种类为新冠病毒、诺如病毒、甲流病毒或乙流病毒。

8.根据权利要求7所述的快速检测病毒核酸的方法，其特征在于，所述检测病毒种类为新冠病毒时，第一检测试剂中的引物AF3和AT7B3、引物AFIP和ABIP为针对N基因特异性片段扩增的引物，第二检测试剂中的引物BF3和BT7B3、引物BFIP和BBIP为针对ORF基因特异性片段扩增的引物；

所述检测病毒种类为诺如病毒时，第一检测试剂中的引物AF3和AT7B3、引物AFIP和ABIP为针对诺如病毒GⅠ型设计的引物，第二检测试剂中的引物BF3和BT7B3、引物BFIP和BBIP为针对诺如病毒GⅡ型设计的引物；

所述检测病毒种类为甲流病毒和乙流病毒时，第一检测试剂中的引物AF3和AT7B3、引物AFIP和ABIP为针对甲流病毒的保守区域设计的引物，第二检测试剂中的引物BF3和BT7B3、引物BFIP和BBIP为针对乙流病毒的保守区域设计的引物。