[发明专利]一种巨噬细胞膜包被的脉络膜新生血管靶向纳米粒及其制备方法

说明书

本发明公开了一种巨噬细胞膜包被的脉络膜新生血管靶向纳米粒及其制备方法。本发明聚乳酸‑羟基乙酸共聚物包载雷帕霉素制备得到雷帕霉素‑PLGA纳米粒并作为内核，巨噬细胞膜作为衣壳包覆于雷帕霉素‑PLGA纳米粒表面；其中，雷帕霉素与聚乳酸‑羟基乙酸共聚物的质量比为1∶9‑20，巨噬细胞膜中蛋白质与聚乳酸‑羟基乙酸共聚物的质量比为1∶1‑1.5。本发明制成的纳米粒生物相容性好，制备方法简单，纳米粒粒径分布均匀。利用巨噬细胞膜表面生物分子主动靶向年龄相关性黄斑变性的关键病变——脉络膜新生血管，有效提高含药载体向新生血管的主动募集，在抑制新生血管的同时也具有在炎症条件下保护视网膜色素上皮的效果。

技术领域

本发明属药物制剂技术领域，具体涉及一种基于巨噬细胞膜包被的装载的雷帕霉素的脉络膜新生血管靶向纳米粒及其制备方法。

背景技术

随着经济社会的发展和人口老龄化进程的加深，致盲性眼病已成为了主要影响人类健康和生活质量的疾病之一。这其中，年龄相关性黄斑变性(AMD)是世界范围内老年人视力损伤的首要原因。目前全球约有2亿人受到年龄相关性黄斑变性所引起的致盲威胁。在我国，随着人口老龄化的加速，AMD的患病率逐年升高，65 岁以上人群中AMD患病率约为13.65％。AMD发病机制多样且复杂，尚无定论，但高龄、基因易感性、氧化应激、炎症等是患病的危险因素。目前，定期向玻璃体腔内注射抗血管内皮生长因子(VEGF)则被证实是唯一有效的治疗方式。尽管抗 VEGF治疗能有效延缓AMD进程，但多中心研究提示，只有约三分之一的病人在初次注射后可获得视力提升。此外，患者在频繁的玻璃体腔注射过程中，将面临疼痛、出血、感染、医源性损伤、视网膜脱离和眼内炎等严重危及视力甚至生命的风险。再者，长期的抗VEGF治疗还被指出会增加地图状萎缩和视网膜纤维化的风险，这将患者的视力置于另一种危险的境地。由此，找到一个AMD根本的通用的发病机制，并且开发靶点针对性的药物，是改变或者辅助现有治疗手段和攻克AMD最可能成功的手段。

在绝大多数的AMD患者中，视网膜色素上皮RPE变性是疾病的原发病变；脉络膜新生血管(CNV)的形成则是该病致盲的首要原因。大量先前研究提示，哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的过度激活在RPE变性和CNV形成中均扮演了重要作用，而mTOR的特异性抑制剂雷帕霉素则被证实具有保护RPE和抑制CNV的双重功效，是一种极具前景的AMD治疗药物。由于眼球自身血-眼屏障的存在和内皮网状系统的摄取作用，全身用药达有效血药浓度时，眼内药物浓度几近微量，因此，向玻璃体腔内注射药物成为了目前治疗视网膜变性疾病的首选。除了上述玻璃体腔注射的风险外，目前研究报道提示璃体腔内注射雷帕霉素由于药物瞬时释放所导致的毒性，仍会引起眼内炎等严重并发症。综上，如果能有一种方式，可以通过全身给药，将雷帕霉素靶向递送至视网膜，则可在提升雷帕霉素生物利用度的同时避免玻璃体腔注射的风险。

近年来，纳米给药系统用于AMD治疗的研究屡见报道。通过使用生物兼容性好、可降解的高分子纳米材料，可实现药物的缓释，增加药效。目前针对小分子药物的递送均局限于玻璃体腔注射，但这一给药方式下，病人的用药依从性差。尚未有静脉给纳米制剂治疗视网膜疾病的报道。在AMD的病程中，来自血液的外源性巨噬细胞向眼部的募集观察病程始终，且在数量上均远远多于其他类型的免疫细胞。更重要的是，这些巨噬细胞已被证实是源自外周血，而非原先存在于眼部的。这意味着巨噬细胞在正常状态下不会进入眼内，却能在炎症的病理状态下穿过血-眼屏障进入视网膜。既往研究指出，巨噬细胞这一炎症趋化特性主要是由其细胞膜上的蛋白质实现的。由此我们提出，如果将巨噬细胞膜对药物进行包覆，则不但能减少内皮网状系统对雷帕霉素的无效摄取，还能利用膜表面的蛋白质对炎性的AMD病变组织所释放的趋化因子、信号分子的主动识别作用，将雷帕霉素通过血液循环招募至 CNV区域，从而增加雷帕霉素在AMD区域的积蓄，增强药效。

由此，本申请的发明人探索用巨噬细胞膜制剂靶向眼部治疗CNV。拟提供一种巨噬细胞膜包被的CNV靶向纳米粒及其制备方法，该系统在抑制新生血管的同时也具有在炎症条件下保护视网膜色素上皮的效果。

发明内容