[发明专利]水稻基因OsPM1基因及启动子提高水稻耐高温胁迫能力的应用在审

专利信息
申请号: 202110477770.5 申请日: 2021-04-30
公开(公告)号: CN113046368A 公开(公告)日: 2021-06-29
发明(设计)人: 葛晓春;安硕;姚玲娅 申请(专利权)人: 复旦大学
主分类号: C12N15/29 分类号: C12N15/29;C12N15/113;C12N15/84;A01H5/00;A01H6/46
代理公司: 上海正旦专利代理有限公司 31200 代理人: 陆飞;陆尤
地址: 200433 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 水稻 基因 ospm1 启动子 提高 耐高温 胁迫 能力 应用
【权利要求书】:

1.一种水稻膜蛋白基因OsPM1或其启动子提高水稻耐高温胁迫能力的应用;所述基因OsPM1核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示,所述基因OsPM1启动子核苷酸序列为SEQ ID NO.4所示。

2.如权利要求1所述应用,其特征在于,所述基因OsPM1提高水稻耐高温胁迫能力的应用,包括提高干旱胁迫下水稻的成活率,从而提高水稻产量;具体是将该基因通过转基因手段转入水稻等粮食作物中,筛选过表达株系,得到抗高温能力增强的作物;具体操作步骤为:

(1)将水稻OsPM1的全长cDNA连入植物过表达载体中,获得含OsPM1基因的植物过表达载体;

(2)将含OsPM1基因的植物过表达载体转入农杆菌EHA105中,将鉴定为阳性的农杆菌侵染水稻愈伤,经过共培养、筛选、分化植物组织培养,获得过表达OsPM1的转基因水稻;

所得的阳性转基因水稻较野生型具有更强的耐高温能力。

3.如权利要求1所述应用,其特征在于,所述基因OsPM1启动子提高水稻耐高温胁迫能力的应用,是将水稻OsPM1基因启动子与高粱中分离的SbHSF03 融合,导入水稻中,筛选阳性转基因株系,得到抗高温能力提高的水稻株系,具体操作步骤如下:

(1)从高粱叶片中扩增到SbHSF03基因的全长cDNA,然后通过基因融合技术将SbHSF03OsPM1基因上游2152bp长的启动子进行无缝连接,将融合基因连入植物转基因载体pCAMBIA1302-eGFP中,获得含有OsPM1::SbHS03融合基因的转基因载体;

(2)将OsPM1::SbHSF03的转基因载体转入农杆菌EHA105中,然后侵染水稻愈伤,经过共培养、筛选、分化植物组织培养,获得由OsPM1启动子驱动SbHSF03表达的转基因水稻;

其中,SbHSF03基因是从高粱中扩增的HSF,其CDS序列如SEQ ID NO.5所示;

得到的转基因水稻在面临逆境或者热胁迫时,能快速上调SbHSF03的表达,从而使得植物在热胁迫下卷叶率下降,膜损伤减少,耐热能力增强。

4.如权利要求2所述应用,其特征在于,所述载体为pCAMBIA1301ubi。

5.如权利要求2所述应用,其特征在于,通过干扰内源OsPM1基因表达,将OsPM1特异性最强的片段以正反双向形式和一段无功能的序列连接,然后连入植物表达载体中,获得RNAi-OsPM1的植物表达载体;然后通过转基因手段获得RNAi-OsPM1的转基因水稻。

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