[发明专利]靶向CRH基因的siRNA及其在神经病理性疼痛治疗中的应用

说明书

本发明属于生物医药技术领域，本发明公开了三组靶向人和小鼠CRH基因的siRNA及其在神经病理性疼痛治疗中的应用，通过设计并合成三组靶向CRH基因(促肾上腺皮质激素释放激素)的siRNA，体内实验时将三组siRNA鞘内注射于神经病理性疼痛模型小鼠，分子生物学实验表明两组siRNA能够在体内阻断小鼠背根神经节(DRG)中由神经损伤所诱导的CRH表达升高，表明此两组siRNA均能有效降低CRH基因的表达，但第2组效果更为明显。疼痛行为学检测表明鞘内注射第2组CRH siRNA能有效地缓解神经病理性疼痛。本发明供了靶向CRH基因的非化学修饰及化学修饰核酸分子，对神经病理性疼痛具有较好的治疗效果，对临床研发新的镇痛药物提供新的思路及实验依据，具有重大的临床应用价值。

技术领域

本发明属于基础医学和生物医药领域，主要针对促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH，也称为corticotropin-releasing factor,CRF)基因表达的调节和/或调节CRH基因表达通路的性状、疾病的化合物、组合物和方法，具体涉及靶向人和小鼠CRH基因的小干扰RNA(Small interfering RNA，siRNA)及其在神经病理性疼痛治疗中的应用。

背景技术

急性疼痛作为对组织损伤的警报系统，对机体具有保护功能。但如果在其完成警报任务后仍然持续存在，这类疼痛就变成危害健康的病理性疼痛(或慢性疼痛)，神经病理性疼痛就是其中的一大类。神经病理性疼痛(neuropathic pain)是指由于中枢神经系统和周围神经系统的躯体感觉传递紊乱而导致的一组疼痛综合征，其产生的原因包括：神经压迫、神经切断、中风、脊髓外伤、糖尿病、病毒感染后的神经病变等。长期的神经病理性疼痛导致人疲乏、睡眠障碍、食欲下降、体重下降、性欲下降、便秘，抑郁，焦虑等症状，严重地影响患者的生活质量。更重要的是长期慢性疼痛的刺激可以促使中枢神经系统发生病理性重构，使疼痛本身变得更加难以控制。临床数据显示(数据来自文献：Pain.2014Apr；155(4):654-662:题目：Neuropathic pain in the general population:A systematic reviewof epidemiological studies)，全球神经性疼痛的患病率在0.9％至17.9％之间。目前对其基础和临床研究进展有限，而且缺乏临床治疗效果好的镇痛药物。目前，市场上的治疗药物主要有水杨酸类药物，非甾体类抗炎药，阿片类镇痛药。临床上水杨酸类药物具有较多副作用，非甾体类抗炎药对此不敏感，阿片类药物虽能缓解，但需要较高剂量并药物耐受限制了其长期使用，为此开发新的靶点及镇痛药亟待解决。

小分子干扰RNA(Small interfering RNA，siRNA)也称为沉默RNA，是一种长20-25个核苷酸的双链RNA，靶向特定信使RNA(mRNA)使其降解，故而其基因功能减弱或丧失。小分子干扰RNA(siRNA)已被临床测试用于几种疾病的治疗，如老年性黄斑退化、肌萎缩侧索硬化、类风湿性关节炎、肥胖症等。siRNA进入体内后干扰特定疾病基因的mRNA，使该基因无法表达蛋白，因而起到疾病治疗作用。与传统临床治疗药物相比，siRNA药物毒副作用小、效率高，是一种最具潜力的基因治疗方法。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在问题或不足，本发明提供靶向人和小鼠CRH基因的siRNA及其在神经病理性疼痛治疗中的应用。

为实现上述发明目的，本发明的实施例提供一种靶向CRH基因的siRNA，其特征在于，所述siRNA为以下双链RNA分子中的任意一种：

CRH siRNA 1

正义序列：5′-GAUGGAGAUUAUCGGGAAATT-3′

反义序列：5′-UUUCCCGAUAAUCUCCAUCTT-3′；

或

CRH siRNA 2