[发明专利]基于DNA分子检测ERGIC3 mRNA的方法有效
| 申请号: | 202110471652.3 | 申请日: | 2021-04-29 | 
| 公开(公告)号: | CN113174427B | 公开(公告)日: | 2023-02-28 | 
| 发明(设计)人: | 吴明松;许永杰;翟薇;孙瑜萍;陈晓易;朱琴琴;刁波;徐玺耀 | 申请(专利权)人: | 遵义医科大学 | 
| 主分类号: | C12Q1/6844 | 分类号: | C12Q1/6844 | 
| 代理公司: | 遵义市创先知识产权代理事务所(普通合伙) 52118 | 代理人: | 刘创先 | 
| 地址: | 563000 贵*** | 国省代码: | 贵州;52 | 
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 基于 dna 分子 检测 ergic3 mrna 方法 | ||
1.一种基于DNA分子检测ERGIC3 mRNA的方法,所述方法为非疾病的诊断和治疗目的,其特征是,包含以下步骤:
针对靶ERGIC3 mRNA,程序化设计和合成检测探针H1、H2作为识别元件,底物探针sub作为报告元件;
先将2.5 μL体积的2μM探针H1、2.5 μL体积的2μM探针H2和5μL体积的2 μM底物探针sub移至扩增系统,再将10-14至10-8浓度的ERGIC3 mRNA加入扩增检测系统,整个反应系统在50μL 1×Nebuffer 2中进行,37℃孵育1小时;
然后用M2光谱进行荧光检测,激发波长为645纳米,记录发射波长范围为655至725纳米;
所述ERGIC3的序列为:GACCAGACAUGAGAAGGUUGCCA;
所述探针H1的序列为:
GGAGACTAGTTGCTGGCAACCTTCTCATGTCTGGTCGCAACTAGTCTCCACAACGAAGGTGTTACAG,
所述探针H2的序列为:
GCACATCTTCAGGCTAGCTGGAGACTAGTTGCGACCAGACATGAGAAGGATTATTACCTTCTCATGTCTGGTC
所述底物探针sub的序列为:
QH1-CUGUAACACCUrGrUGAAGAUGUGC-Cy5。
2.根据权利要求1所述的基于DNA分子检测ERGIC3 mRNA的方法,其特征是:所述50μL 1×Nebuffer 2的pH为7.9,由以下成分组成:50mM氯化钠,10 mMTrisHCl,10 mM氯化镁,1 mMDTT。
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