[发明专利]外周血全血长链非编码RNA作为诊断抑郁症的用途

权利要求书

1.外周血全血长链非编码RNA作为标志物在制备抑郁症诊断试剂中的应用，其特征在于，发现四条LncRNA作为特异性诊断抑郁症的生物标志物的新用途，通过对抑郁症及健康受试者外周血全血进行全转录组测序，分析抑郁症及健康受试者差异表达LncRNA，然后再通过qRT-PCR进行扩大样本验证；

所述LncRNA包括AL355075.4-201、AC136475.8-201、AC012076.1-201和SPATA13-AS1-201。

2.根据权利要求1所述的外周血全血长链非编码RNA作为标志物在制备抑郁症诊断试剂中的应用，其特征在于，所述抑郁症的诊断价值试验操作包括以下步骤：

S1、血样采集、全转录组测序、靶基因预测和富集分析；

S2、根据全转录测序结果，筛选出MDD组和健康受试者外周血全血差异表达LncRNA；

S3、设计引物，用于扩增LncRNA的引物序列；

S4、收集全血样品，设置对照试验组；

S5、空腹抽取全血并收集；

S6、全血RNA提取并分析

操作步骤如下：

S61、全血样本采集提取；

S62、测定样本的RNA纯度，电泳检测RNA的完整性；

S7、扩大样本验证，进行RNA反转录

操作步骤如下：

S71、基因组DNA去除

离心管中配置如下混合液，用移液器轻轻吹打混匀；

S72、配置逆转录反应体系

在步骤S71的反应管中直接加入5x HiScript III qRT SuperMix，用移液器轻轻吹打混匀；

S73、进行逆转录反应；

S8、qRT-PCR反应验证

操作步骤如下；

S81、在qPCR管中配置混合液；

S82、进行qPCR反应验证。

3.根据权利要求2所述的外周血全血长链非编码RNA作为标志物在制备抑郁症诊断试剂中的应用，其特征在于，所述步骤S1中血样采集需受试者空腹抽取全血，并在冷冻条件下保存。

4.根据权利要求2所述的外周血全血长链非编码RNA作为标志物在制备抑郁症诊断试剂中的应用，其特征在于，所述步骤S2中差异表达lncRNA，满足pvalues0.05且|log2FC|1为差异基因，其中log21标记为上调基因；log2-1标记为下调基因。

5.根据权利要求2所述的外周血全血长链非编码RNA作为标志物在制备抑郁症诊断试剂中的应用，其特征在于，所述步骤S5中采血后立即混匀，在室温下直立存储2h，后转移至-20℃冷冻24h，保存于-80℃。

6.根据权利要求2所述的外周血全血长链非编码RNA作为标志物在制备抑郁症诊断试剂中的应用，其特征在于，所述步骤S6中RNA样本电泳结果要求具有清晰的5s，18s，28s条带，无明显降解。

7.根据权利要求2所述的外周血全血长链非编码RNA作为标志物在制备抑郁症诊断试剂中的应用，其特征在于，所述步骤S6中RNA样本浓度≥50ng/μL，总量≥1μg，A260/280介于1.8-2.2之间。