[发明专利]用于纯化抗血清的固相亲和吸附剂以及获得纯化的抗体的方法在审
申请号: | 202110447539.1 | 申请日: | 2021-04-25 |
公开(公告)号: | CN113042016A | 公开(公告)日: | 2021-06-29 |
发明(设计)人: | 程世俊;周伟;曹梅;朱婷婷;陈毅 | 申请(专利权)人: | 上海捷门生物技术有限公司 |
主分类号: | B01J20/26 | 分类号: | B01J20/26;B01J20/34;B01J20/30;C07K1/22;C07K16/00 |
代理公司: | 上海上谷知识产权代理有限公司 31342 | 代理人: | 蔡继清 |
地址: | 201806 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 纯化 血清 相亲 吸附剂 以及 获得 抗体 方法 | ||
1.一种用于纯化抗血清的固相亲和吸附剂,其特征在于,所述固相亲和吸附剂的制备步骤包括:用生物分子交联剂处理不含特定蛋白的人全血清。
2.根据权利要求1所述的固相亲和吸附剂,其特征在于,所述生物分子交联剂至少具有两个与其他生物分子发生交联的反应性末端。
3.根据权利要求1所述的固相亲和吸附剂,其特征在于,所述生物分子交联剂至少具有两个与其他生物分子上的氨基、羧基和/或巯基发生交联的反应性末端。
4.根据权利要求1所述的固相亲和吸附剂,其特征在于,所述生物分子交联剂含有至少两个作为反应性末端的醛基、亚胺基或酰胺基;优选地,所述生物分子交联剂含有至少两个作为反应性末端的醛基。
5.根据权利要求1所述的固相亲和吸附剂,其特征在于,所述生物分子交联剂为其中,n为不小于1的整数;优选地,n为不小于1且不大于10的整数。
6.根据权利要求1所述的固相亲和吸附剂,其特征在于,所述固相亲和吸附剂的制备步骤包括:
步骤(1),在搅拌条件下,在所述不含特定蛋白的人全血清中滴加所述生物分子交联剂,后持续搅拌5~30分钟,即得所述固相亲和吸附剂。
7.根据权利要求6所述的固相亲和吸附剂,其特征在于,所述不含特定蛋白的人全血清可由下述方法获得:使人全血清通过固定相连接有抗特定蛋白抗体的层析柱,收集流川液即得不含特定蛋白的人全血清。
8.根据权利要求6所述的固相亲和吸附剂,其特征在于,所述固相亲和吸附剂的制备中,步骤(1)后还包括:
步骤(2),用磷酸缓冲溶液洗涤步骤(1)所得的固相亲和吸附剂。
9.一种获得纯化的抗体的方法,其特征在于,所述方法包括:步骤(A),将待纯化的抗血清先用固相亲和吸附剂和辛酸中的一种处理,去除沉淀所得液体再用固相亲和吸附剂和辛酸中的另一种处理,去除沉淀所得液体再用硫酸铵处理,收集所得沉淀溶解后透析,即得所述纯化的抗体。
10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述固相亲和吸附剂和所述待纯化的抗血清的使用体积比为:1:(2~8);
和/或,所述反应为水浴反应;
和/或,所述去除沉淀的方式为离心,所述离心的转速为4000rpm/分钟。
11.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,将所述沉淀先用酸性缓冲液洗涤后用磷酸缓冲液洗涤,即得去除杂蛋白的固相亲和吸附剂,所述去除杂蛋白的固相亲和吸附剂可重复用于获得纯化的抗体。
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