[发明专利]一种外泌体分泌培养基及脐带间充质干细胞外泌体的培养分离方法有效
| 申请号： | 202110446820.3 | 申请日： | 2021-04-23 |
| 公开（公告）号： | CN112920996B | 公开（公告）日： | 2023-05-02 |
| 发明（设计）人： | 麦志国;刘元旦;陈群珍;尹丽珍 | 申请（专利权）人： | 广州研华生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人： | 黄燕 |
| 地址： | 511400 广东省广州市南*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 外泌体 分泌 培养基 脐带 间充质 干细胞 培养 分离 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种外泌体分泌培养基，其特征在于，其以无血清干细胞培养基为基础培养基，添加以下组分：200ng/ml的EGF、150ng/ml的TGF、30μg/ml的辅酶Q10、600μg/ml的钾盐、0.6μg/ml的果糖二磷酸钠和300μg/ml的组胺二盐酸盐；所述钾盐为：氯化钾溶于磷酸二氢钾缓冲液和磷酸氢二钾缓冲液的混合盐溶液，所述磷酸二氢钾缓冲液和磷酸氢二钾缓冲液的总浓度为0.01mol/L，pH为7.4，所述氯化钾在混合盐溶液中的浓度为1g/L；
所述无血清干细胞培养基以D-MEM培养基和人血白蛋白为基础培养基，所述无血清干细胞培养基含质量浓度为5％-10%的人血白蛋白。
2.脐带间充质干细胞外泌体的培养方法，其特征在于，其包括如下步骤：将脐带间充质干细胞传代培养至第三代后，去除培养基，清洗细胞后加入权利要求1所述的外泌体分泌培养基进行培养。
3.根据权利要求2所述的脐带间充质干细胞外泌体的培养方法，其特征在于，加入外泌体分泌培养基后每间隔1-3天更换一次所述外泌体分泌培养基，并收集每次更换后的培养液。
4.根据权利要求3所述的脐带间充质干细胞外泌体的培养方法，其特征在于，更换培养基前，对脐带间充质干细胞总细胞数进行计数，每100万个加入10-20ml外泌体分泌培养基。
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