[发明专利]基于UHPLC-Q-Orbitrap MS筛查和定量30种合成染料的方法及应用

说明书

本发明公开了一种基于UHPLC‑Q‑Orbitrap MS筛查和定量30种合成染料的方法及应用。利用超高效液相色谱－四极杆－静电场轨道阱高分辨质谱UHPLC‑Q‑Orbitrap MS检测合成染料标准品，优化色谱、质谱条件建立30种合成染料的筛查数据库，并在TraceFinder中建立合成染料的标准曲线。在样品测试中直接将检测得到的数据导入数据库进行筛查，能够在无需标准品条件下实现30种多类别合成染料的非靶高通量筛查，还能实现检测样品中的合成染料的定量，线性范围均大于0.99，其检出限和定量限分别0.23～6.28μg/kg和0.77～20.52μg/kg，实用性强，应用前景良好。

技术领域

本发明涉及合成染料检测技术领域，具体地，涉及一种基于 UHPLC-Q-OrbitrapMS筛查和定量30种合成染料的方法及应用。

背景技术

颜色是食品的关键特征，它能够直接影响消费者的接受程度和食物选择。因 此，在食品行业中，为了弥补加工或储存过程中损失的色泽往往会向食品中添加 染料。染料可分为天然染料和合成染料。合成染料是从煤焦油分馏出来(或石油 加工)经化学加工而成的。与天然染料相比，合成染料因其价格低廉、着色能力 强和性质稳定等优点往往会代替天然染料用于食品生产中。近年来的研究表明， 合成染料具有遗传毒性、神经毒性和致癌性等；此外，合成染料的使用没有任何 营养价值和防腐功能。目前，许多国家已经制定了相应的法规来监管合成染料允 许使用种类和使用量。因此，开发一种快速而可靠的分析方法用于控制食品中的 合成染料滥用行为具有至关重要的意义。

目前，食品中合成染料常用的检测方法是液相色谱法，检测器多为紫外检测 器和二极管阵列检测器。例如：公开号为CN102221582A的中国专利公开了一种 火锅底料中罗丹明B的快速检测方法，采用液相色谱仪对净化后的火锅底料进 行离子交换色谱-荧光检测，得到火锅底料的液相色谱图，以达到快速检测火锅 底料中罗丹明B的目的。但该方法无法识别没有可见光吸收特异性的染料，且 灵敏度不高。同时，色谱分析过程中存在共流出物，导致其检测结果不准确。而 UHPLC-Q-Orbitrap MS只有一个母离子和子离子便可定性，其高灵敏度、高选择 性有效降低了假阳性。然而，目前基于LC-MS/MS的合成染料测定方法大多关 注于一类性质相同的合成染料，例如：公开号为CN 109632988 A的中国专利公 开了一种分散染料含量的检测方法，具体公开了利用LC-MS/MS检测30种分散 染料的方法。现有技术中仍缺乏能够同时测定不同酸碱性、水溶性、极性的多类 别染料的检测方法。因此，急需建立一种基于UHPLC-Q-Orbitrap MS快速筛查 和定量食品中不同酸碱性和极性合成染料的方法。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述缺陷和不足，提供一种基于UHPLC-Q-Orbitrap MS筛查和定量30种合成染料的方法。

本发明的第二个目的在于提供上述方法在食品质量安全检测或出入境检验 检疫中的应用。

本发明的上述目的是通过以下技术方案给予实现的：

一种基于UHPLC-Q-Orbitrap MS筛查和定量30种合成染料的方法，包括以 下步骤：

S1.通过超高效液相色谱－四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱 UHPLC-Q-OrbitrapMS获取30种合成染料标准物质的精确质荷比、保留时间、 二级碎片的信息，将合成染料的名称、分子式、CAS、精确质荷比、化合物的加 合方式、保留时间和二级碎片信息输入TraceFinder以建立合成染料的筛查数据 库；将一系列浓度梯度的合成染料标准品数据文件导入TraceFinder，建立30种 合成染料的标准曲线用于后期样本中的合成染料的定量；

S2.将待测样品加入提取剂中，经涡旋振荡后超声提取，离心取上清液，过 膜，检测过膜后的上清液，通过超高效液相色谱－四极杆/静电场轨道阱高分辨 质谱UHPLC-Q-Orbitrap MS进行检测；