[发明专利]基于UHPLC-Q-Orbitrap MS筛查和定量30种合成染料的方法及应用

权利要求书

1.一种基于UHPLC-Q-Orbitrap MS筛查和定量30种合成染料的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.通过超高效液相色谱－四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱UHPLC-Q-Orbitrap MS获取30种合成染料标准物质的精确质荷比、保留时间、二级碎片的信息，将合成染料的名称、分子式、CAS、精确质荷比、化合物的加合方式、保留时间和二级碎片信息输入TraceFinder以建立合成染料的筛查数据库；将一系列浓度梯度的合成染料标准品数据文件导入TraceFinder，建立30种合成染料的标准曲线用于后期样本中的合成染料的定量；

S2.将待测样品加入提取剂中，经涡旋振荡后超声提取，离心取上清液，过膜，检测过膜后的上清液，通过超高效液相色谱－四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱UHPLC-Q-OrbitrapMS进行检测；

S3.将步骤S2检测得到的样本数据导入步骤S1数据库进行筛查，并基于TraceFinder对合成染料进行定性定量分析；

所述30种合成染料为柠檬黄、诱惑红、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝、赤藓红B、靛蓝、苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ、苏丹红7B、苏丹红G、苏丹黄、对位红、喹啉黄、罗丹明B、罗丹明6G、酸性蓝3、监牢绿、碱性橙21、碱性橙Ⅱ、碱性橙22、酸性橙1、酸性橙2、偶氮玉红、酸性黄36、颜料橙5、颜料红53:1；

步骤S1、S2所述超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱UHPLC-Q-OrbitrapMS的色谱和质谱条件为：

所述色谱条件为：色谱柱：苯基柱ACQUITY UPLC BEH Phenyl，内径×长为2.1×100mm，粒径为1.7μm；流速0.2mL/min；进样体积：5μL；流动相：乙腈和5mmol/L乙酸铵溶液；梯度洗脱测序如下：0～1min，90％乙酸铵溶液；1～2min，90～80％乙酸铵溶液；2～3min，80～40％乙酸铵溶液；3～5min，40～20％乙酸铵溶液；5～7min，20～5％乙酸铵溶液；7～10min，5％乙酸铵溶液；10～11min，5～90％乙酸铵溶液；11～14min，90％乙酸铵溶液；所述百分数为乙酸铵溶液占乙腈、乙酸铵溶液混合液的体积百分数；

所述质谱条件为：喷雾电压：正离子模式+3.5kv，负离子模式-3.2kv；离子传输管温度：350℃；鞘气流速：45arb；辅助气流速：15arb；s-lens电压：50v；加热温度：250℃；扫描范围：150-1000m/z；一级质谱全扫描分辨率：R＝70000；自动增益控制做Full MS时C-Trap中的目标离子数目：3e6；最大注入时间：100ms；数据依赖二级离子全扫描分辨率：R＝17500；AGCtarget：2e5；最大注入时间：50ms；归一化碰撞能：20ev，40ev，60ev；动态排除：10s；

步骤S2所述的样品包括牛奶、运动饮料、牛肉制品中的任意一种或多种；所述提取剂为甲醇和/或乙腈；甲醇和乙腈的体积比为(1～16)：4。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S2所述超声功率为40kHz，超声温度30℃，超声时间为15min。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S2所述离心转速为12000rpm，温度4℃，离心时间为15min。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S2所述过膜所用的膜的孔径为0.22μm。

5.权利要求1～4任一所述方法在食品质量安全检测或出入境检验检疫中的应用。