[发明专利]基于糖肽的荧光分子印迹聚合物及制备方法和在糖蛋白筛选和检测中的应用

权利要求书

1.基于糖肽的荧光分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，将OVA的短糖肽固定化的N-GQDs@SiO₂@FPBA分散在磷酸盐缓冲溶液中，加入MAA和MBA，超声溶解后在28-32℃下预组装11-13h，然后加入TEMED和APS，并在惰性气体保护下于28-32℃反应3-9h，洗脱，得到基于糖肽的荧光分子印迹聚合物；

OVA的短糖肽固定化的N-GQDs@SiO₂@FPBA通过以下过程制得：

将完整OVA固定化的N-GQDs@SiO₂@FPBA分散到碳酸氢铵缓冲溶液中，并加入Tryspin溶液，37℃下反应3h后洗涤，得到OVA的长糖肽固定化的N-GQDs@SiO₂@FPBA；

将OVA的长糖肽固定化的N-GQDs@SiO₂@FPBA分散到碳酸氢铵缓冲溶液中，加入PronaseE溶液，37℃下反应3h后洗涤，得到OVA的短糖肽固定化的N-GQDs@SiO₂@FPBA。

2.根据权利要求1所述的基于糖肽的荧光分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，MAA和MBA的比为11-88μL：38-42mg；

MAA、TEMED和APS的比为11-88μL：95-105μL：595-605mg。

3.根据权利要求1所述的基于糖肽的荧光分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，完整OVA固定化的N-GQDs@SiO₂@FPBA通过以下过程制得：将N-GQDs@SiO₂@FPBA纳米颗粒和含有氯化钠的碳酸氢铵缓冲溶液混合并超声以分散均匀，然后加入OVA后在室温下孵育3h，洗涤，得到完整OVA固定化的N-GQDs@SiO₂@FPBA；其中，N-GQDs@SiO₂@FPBA纳米颗粒与OVA的比为100-105mg：12.5-50mg。

4.根据权利要求3所述的基于糖肽的荧光分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，N-GQDs@SiO₂@FPBA纳米颗粒通过以下过程制得：

1)将CA和EDA溶于超纯水中，搅拌至澄清，然后移至反应釜，并在160-200℃下反应6-10h，向产物中加入过量无水乙醇，得到N-GQD；

2)在搅拌下将N-GQDs、TEOS和APTES加入无水乙醇中，室温下反应1-3h，洗涤，干燥，得到N-GQDs@SiO₂纳米粒子；

3)将N-GQDs@SiO₂、无水甲苯、APTES和MPS放入容器中，超声30min，得到混悬液；将混悬液在N₂保护下于90-120℃回流12-24h，洗涤，干燥，得到N-GQDs@SiO₂@MPS；

4)将N-GQDs@SiO₂@MPS纳米粒子490-510mg和4-FPBA 0.9-1.1g加入至无水甲醇38-42mL中，25-30℃下反应24h，然后每隔4h加入NaBH_4-100mg并保持24h，洗涤，干燥，得到N-GQDs@SiO₂@FPBA纳米颗粒。

5.根据权利要求4所述的基于糖肽的荧光分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，步骤1)中，CA、EDA与超纯水的比为0.22-0.23g：0.18-0.22mL：4.5-5.5mL。

6.根据权利要求4所述的基于糖肽的荧光分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，步骤2)中，N-GQDs、TEOS和APTES加入无水乙醇的比为10-12mL：20-60μL：20-60μL：30-50mL。

7.根据权利要求4所述的基于糖肽的荧光分子印迹聚合物的制备方法，其特征在于，步骤3)中，N-GQDs@SiO₂、无水甲苯、APTES和MPS的比为790-810mg：10-11mL：5-6mL：5-6mL。