[发明专利]杂交瘤细胞株及其产生的单克隆抗体和应用以及一种免疫荧光试纸条

说明书

本发明属于医学检验技术领域，尤其涉及一种杂交瘤细胞株、一种单克隆抗体和它们在检测CK‑MB中的应用以及一种免疫荧光试纸条。所述杂交瘤细胞株的保藏编号为CCTCC NO：C202086，其分泌的单克隆抗体与CK‑MB蛋白结合的灵敏度高，特异性好，能够在多种指标蛋白的共同存在的情况下，与CK‑MB蛋白特异性结合。

技术领域

本发明属于医学检验技术领域，尤其涉及一种杂交瘤细胞株、一种单克隆抗体和它们在检测CK-MB中的应用以及一种免疫荧光试纸条。

背景技术

肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)通常存在于动物的心脏、肌肉以及脑等组织的细胞浆和线粒体中，是一种与细胞内能量转运，肌肉收缩和ATP再生有直接关系的重要激酶，它可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应，是一个二聚体，有3种同工酶的形式存在：2个B单体(CK-BB)，2个M单体(CK-MM)和MB的单体混合体(CK-MB)。肌酸激酶同工酶(CK-MB)主要分布于心肌中，占CK总量的15％～25％，当心肌收到损伤时，CK-MB会释放到血液中，因此测定CK-MB含量对心肌类疾病的诊断有着极大的临床意义，尤其是在急性心肌梗死(AMI)时，血液中的CK-MB含量是临床诊断中的一个重要决定因素，临床医生可以利用CK-MB质量升高的程度对该疾病进行危险分层，利用该分层建立合理的治疗方案，减轻患者的痛苦和经济负担；还可以作为不稳定型心绞痛(UA)的预后判断，临床医生可根据血清CK-MB定量检测结果来判断UA患者的预后情况，方便选择最佳的治疗方案，达到最佳的治疗效果。

在现有的CK-MB含量测定方法中，满足检测迅速、省时且敏感度较高的方法首推免疫抑制法，但是免疫抑制法很容易受到诸如酶失活、巨CK分子酶、CK-BB等因素的干扰，导致最终的检测结果不准确，因此获取一种高灵敏度、特异性好，检测结果准确的CK-MB检测方法一直是本领域技术人员的研究方向。

发明内容

针对现有技术中血清中CK-MB蛋白含量的检测方法存在误差大，不准确的技术问题，本发明提供一种杂交瘤细胞株及其产生的单克隆抗体和应用以及一种免疫荧光试纸条，实现了血清中CK-MB含量的准确检测，灵敏度高且特异性好。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案。

第一方面，本发明实施例提供一种杂交瘤细胞株，所述杂交瘤细胞株的保藏编号为：CCTCC NO：C202086。保藏日期为2020年06月10日，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，地址位于湖北省武汉市武昌区八一路299号，命名为抗CK-MB的杂交瘤细胞株2F6。

本发明的杂交瘤细胞株是本发明的发明人自行融合筛选得到的，其产生的单克隆抗体为IgG3型，亲和力好，与CK-MB蛋白结合的灵敏度高，特异性好，能够在多种指标蛋白的共同存在的情况下与CK-MB蛋白特异性结合，检测结果准确。

第二方面，本发明实施例还提供所述杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体。

第三方面，本发明实施例还提供了所述单克隆抗体在检测血清中CK-MB含量中的应用。

第四方面，本发明实施例还提供了一种CK-MB免疫荧光试纸条，所述免疫荧光试纸条包括PVC底板、硝酸纤维素膜、吸水垫、样品垫和结合垫，其中所述硝酸纤维素膜上延层析方向先后设有检测线和质控线，所述检测线喷涂有所述杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体，所述质控线喷涂有羊抗兔IgG抗体，结合垫上填有由荧光微球与CK-MB抗体复合形成的荧光标记物。