[发明专利]一种鉴定肿瘤类器官的方法在审

专利信息
申请号: 202110408280.X 申请日: 2021-04-15
公开(公告)号: CN113201592A 公开(公告)日: 2021-08-03
发明(设计)人: 周正;黄啸;杨光;牛建军;刘平果;张以平 申请(专利权)人: 南昌五元生物科技有限公司
主分类号: C12Q1/6886 分类号: C12Q1/6886;C12N15/11
代理公司: 广州三环专利商标代理有限公司 44202 代理人: 颜希文
地址: 330000 江西省南昌市南昌高新技术产业开*** 国省代码: 江西;36
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摘要:
搜索关键词: 一种 鉴定 肿瘤 器官 方法
【权利要求书】:

1.一种鉴定肿瘤类器官的方法,其特征在于,包括以下步骤:

检测待测细胞群体的APOB基因或CREB3L3基因的表达水平。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:

检测待测细胞群体的APOB基因或CREB3L3基因的拷贝数或拷贝倍数。

3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述肿瘤为肝癌。

4.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,具体包括以下步骤:

提取正常组织类器官RNA和肿瘤类器官RNA,将正常组织类器官RNA、肿瘤类器官RNA及参照RNA进行反转录分别得到cDNA产物,然后分别将cDNA产物进行PCR扩增,得到针对APOB基因或CREB3L3基因的Cp值,通过相对定量或绝对定量的方式计算肿瘤类器官RNA中APOB基因或CREB3L3的拷贝数或拷贝数倍数。

5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,基于绝对定量法,参照RNA为APOB标准品RNA,基于相对定量法,参照RNA为参考细胞系RNA。

6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述APOB标准品RNA的制备包括以下步骤:提取参考细胞系RNA,使用APOB引物将提取的参考细胞系RNA进行反转录,然后将反转录得到的产物进行PCR扩增、纯化,再将纯化后的产物进行T7体外转录、纯化和稀释,得APOB标准品RNA。

7.如权利要求4所述的方法,其特征在于,正常组织类器官RNA和肿瘤类器官RNA在体系中的用量为700ng。

8.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述APOB引物的序列如SEQ ID NO.1所示。

9.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述APOB标准品RNA稀释后的浓度为105~1012拷贝数/ul。

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