[发明专利]一种鉴定肿瘤类器官的方法在审
申请号: | 202110408280.X | 申请日: | 2021-04-15 |
公开(公告)号: | CN113201592A | 公开(公告)日: | 2021-08-03 |
发明(设计)人: | 周正;黄啸;杨光;牛建军;刘平果;张以平 | 申请(专利权)人: | 南昌五元生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12N15/11 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 颜希文 |
地址: | 330000 江西省南昌市南昌高新技术产业开*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴定 肿瘤 器官 方法 | ||
1.一种鉴定肿瘤类器官的方法,其特征在于,包括以下步骤:
检测待测细胞群体的APOB基因或CREB3L3基因的表达水平。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:
检测待测细胞群体的APOB基因或CREB3L3基因的拷贝数或拷贝倍数。
3.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述肿瘤为肝癌。
4.如权利要求1或2所述的方法,其特征在于,具体包括以下步骤:
提取正常组织类器官RNA和肿瘤类器官RNA,将正常组织类器官RNA、肿瘤类器官RNA及参照RNA进行反转录分别得到cDNA产物,然后分别将cDNA产物进行PCR扩增,得到针对APOB基因或CREB3L3基因的Cp值,通过相对定量或绝对定量的方式计算肿瘤类器官RNA中APOB基因或CREB3L3的拷贝数或拷贝数倍数。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,基于绝对定量法,参照RNA为APOB标准品RNA,基于相对定量法,参照RNA为参考细胞系RNA。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述APOB标准品RNA的制备包括以下步骤:提取参考细胞系RNA,使用APOB引物将提取的参考细胞系RNA进行反转录,然后将反转录得到的产物进行PCR扩增、纯化,再将纯化后的产物进行T7体外转录、纯化和稀释,得APOB标准品RNA。
7.如权利要求4所述的方法,其特征在于,正常组织类器官RNA和肿瘤类器官RNA在体系中的用量为700ng。
8.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述APOB引物的序列如SEQ ID NO.1所示。
9.如权利要求6所述的方法,其特征在于,所述APOB标准品RNA稀释后的浓度为105~1012拷贝数/ul。
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