[发明专利]液相色谱中双重梯度系统及其配套的洗脱程序设置方法

权利要求书

1.一种液相色谱中双重梯度系统，其特征在于：包括依序连接的液相组合泵、混合器、进样装置、分离柱和检测器；所述液相组合泵可向所述混合器独立抽送至少三种溶剂作为流动相，所述三种溶剂分别为弱溶剂、强溶剂A和强溶剂B，所述弱溶剂、强溶剂A和强溶剂B对于分离目标物的洗脱能力依序增强；所述液相组合泵通过调节所抽送溶剂之间的比例，形成流动相的第一洗脱梯度和第二洗脱梯度，所述第一洗脱梯度为所述弱溶剂与所述强溶剂A和强溶剂B之和的比例，所述第二洗脱梯度为所述强溶剂A与强溶剂B的比例。

2.根据权利要求1所述的液相色谱中双重梯度系统，其特征在于：所述液相组合泵为内置梯度比例阀的单个泵；或者，所述液相组合泵由两个泵组成，其中一个泵内置有梯度比例阀；或者，所述液相组合泵由三个泵组成。

3.根据权利要求1所述的液相色谱中双重梯度系统，其特征在于：所述进样装置为自动进样器或定量环。

4.根据权利要求1所述的液相色谱中双重梯度系统，其特征在于：所述分离柱为颗粒填料色谱柱、整体柱、固相萃取柱或薄层色谱板。

5.根据权利要求1所述的液相色谱中双重梯度系统，其特征在于：所述弱溶剂为水，所述强溶剂A为乙腈或甲醇，所述强溶剂B为异丙醇、二氯甲烷、四氢呋喃或正己烷。

6.权利要求1-5任一项所述的液相色谱中双重梯度系统的配套的洗脱程序设置方法，其特征在于：按照第一洗脱梯度和第二洗脱梯度来设置流动相；第一洗脱梯度中弱溶剂的初始比例大于强溶剂A与强溶剂B的初始比例之和，第二洗脱梯度中强溶剂A的初始比例大于强溶剂B的初始比例；然后，第一洗脱梯度中强溶剂A与强溶剂B的比例之和逐渐提高将弱溶剂置换，第二洗脱梯度中强溶剂B的比例逐渐提高最后将强溶剂A置换。

7.根据权利要求6所述的洗脱程序设置方法，其特征在于：设置梯度洗脱程序如下：

初始节点：第一洗脱梯度中弱溶剂的初始比例为90％，强溶剂A和强溶剂B的初始比例之和为10％；所述第二洗脱梯度中强溶剂A和强溶剂B的初始比例分别为100％和0；

中间阶段：第一洗脱梯度中弱溶剂的比例逐渐降低至10％，强溶剂A和强溶剂B的比例之和逐渐提高至90％；第二洗脱梯度中强溶剂A的比例逐渐降低至20％，强溶剂B的比例逐渐提高至80％；

最后阶段：第一洗脱梯度中弱溶剂的比例变为0，强溶剂A和强溶剂B的比例之和变为100％，第二洗脱梯度中强溶剂A和强溶剂B的比例分别变为0和100％，即流动相变为强溶剂B。

8.根据权利要求7所述的洗脱程序设置方法，其特征在于：所述中间阶段的持续时间为20分钟。

9.根据权利要求7所述的洗脱程序设置方法，其特征在于：所述最后阶段的持续时间为5分钟。

10.根据权利要求7所述的洗脱程序设置方法，其特征在于：所述液相组合泵抽送溶剂的总流速设置为0.4mL/min。