[发明专利]一种烟草青枯病菌快速免疫检测试纸条及其制备方法和应用有效
申请号: | 202110407113.3 | 申请日: | 2021-04-15 |
公开(公告)号: | CN113189331B | 公开(公告)日: | 2023-07-18 |
发明(设计)人: | 王晓强;袁源;王凤龙;任广伟;王东坤;李艺池;王文静 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院烟草研究所(中国烟草总公司青州烟草研究所) |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/558;G01N33/532 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 宋海海 |
地址: | 266101 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 烟草 病菌 快速 免疫 检测 试纸 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种烟草青枯病菌快速免疫检测试纸条,其特征在于,所述试纸条包含抗烟草青枯病菌单克隆抗体,其中,所述抗烟草青枯病菌单克隆抗体的重链可变区包含如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列,其轻链可变区包含如SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。
2.如权利要求1所述的试纸条,其特征在于,所述烟草青枯病菌快速免疫检测试纸条包括:底板,所述底板上依次设置有吸水垫、检测垫、金标垫和样品垫,相邻各垫在连接处交叠连接。
3.如权利要求2所述的试纸条,其特征在于,所述检测垫以硝酸纤维素膜为基垫,硝酸纤维素膜上依次设置质控线和检测线,所述检测线上包被有抗烟草青枯病菌多克隆抗体,所述质控线上包被有羊抗小鼠IgG;
所述金标垫上喷涂有纳米金标记的抗烟草青枯病菌单克隆抗体。
4.如权利要求2所述的试纸条,其特征在于,所述吸水垫长度控制为15-20mm,宽度控制为3-5mm;检测垫长度控制为20-25mm,宽度控制为3-5mm;金标垫长度控制为3-7mm,宽度控制为3-5mm;样品垫长度控制为20-25mm,宽度控制为3-5mm,相邻各垫的交叠长度控制为3-6mm;或,
所述检测垫上的质控线与检测线的间距控制为3-6mm,检测线与硝酸纤维素膜上沿之间的间距为13-18mm。
5.如权利要求2所述的试纸条,其特征在于,所述金标垫中所用的纳米金粒径控制为30-50nm;所述金标垫上每厘米喷涂长度所需的纳米金标记的抗烟草青枯病菌单克隆抗体的用量为80-120ng;检测垫检测线上每厘米喷涂长度所需的抗烟草青枯病菌多克隆抗体的用量为80-120ng。
6.权利要求1-5任一项所述烟草青枯病菌快速免疫检测试纸条的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括:将抗烟草青枯病菌单克隆抗体加入到纳米金中,获得纳米金标记的抗烟草青枯病菌单克隆抗体,并喷涂至金标垫上。
7.如权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括:在底板上按顺序粘贴上吸水垫、检测垫、金标垫和样品垫,组装形成试纸条。
8.如权利要求7所述的制备方法,其特征在于,检测垫以硝酸纤维素膜为基垫,硝酸纤维素膜上依次设置质控线和检测线,所述检测线上包被有抗烟草青枯病菌多克隆抗体,所述质控线上包被有羊抗小鼠IgG。
9.权利要求1-5任一项所述试纸条在烟草青枯病菌检测中的应用。
10.一种快速检测烟草青枯病菌的方法,其特征在于,所述方法包括:采用权利要求1-5任一项所述试纸条对待测样品进行检测,分析检测结果。
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