[发明专利]一种恩替卡韦口服溶液有关物质分析方法

说明书

本发明公开了一种恩替卡韦口服溶液有关物质分析方法，采用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料，采用紫外检测器，选用适当的有机溶剂和缓冲溶液为流动相，梯度洗脱，有效完成恩替卡韦及其相关杂质的分离，保证杂质的有效检出。本发明专属性好，能将存在的降解杂质、残留中间体、紫外吸收的辅料与主成分有效分开，且灵敏度高，能够应用于恩替卡韦口服溶液的质量控制。

技术领域

本发明涉及药物有关物质测定技术领域，尤其涉及是一种恩替卡韦口服溶液有关物质分析方法。

背景技术

有关物质与药品质量、安全性及疗效密切相关，有关物质的存在可能会降低药物的疗效，甚至引起毒副作用，因此，必须通过适当的检测分析方法控制药物中有关物质的种类和含量，确保药品质量。

恩替卡韦是鸟嘌呤核苷类似物，对乙肝病毒(HBV)多聚酶具有抑制作用，化学名称：2-氨基-9-((1S,3R,4S)-4-羟基-3-(羟甲基)-2-甲烯基环戊基)-3H-嘌呤-6(9H)-酮|9-(4-羟基-3-羟甲基-2-亚甲基环戊-1-基)鸟嘌呤。

恩替卡韦口服溶液属于3类新药，即在国外上市未在国内上市的药物。然而，目前国内外均未有该品种的有关物质检测方法报道，另通过对原研说明书的查询，恩替卡韦口服溶液处方中含有多种具有紫外吸收的辅料，例如麦芽糖醇、羟苯甲酯、羟苯丙酯等，增加了有关物质分析方法开发的难度。

因此，亟待开发一种灵敏性高，专属性好的恩替卡韦口服溶液有关物质分析方法，以实现对恩替卡韦口服溶液中有关物质的质量控制。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提出的一种恩替卡韦口服溶液有关物质分析方法。

本发明保护一种恩替卡韦口服溶液有关物质分析方法，所述的有关物质为以下10种：EP杂质A、EP杂质B、EP杂质C、EP杂质D、EP杂质E、EP杂质F、鸟嘌呤、呋喃恩替卡韦、恩替卡韦N2类似物和4-二甲基硅烷恩替卡韦。采用高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱填料，采用紫外检测器，选用适当的有机溶剂和缓冲溶液为流动相，梯度洗脱，有效完成恩替卡韦及其相关杂质的分离，保证杂质的有效检出。

其中，EP杂质A、EP杂质B、EP杂质C、EP杂质D、EP杂质E、EP杂质F、鸟嘌呤、呋喃恩替卡韦、恩替卡韦N2类似物、4-二甲基硅烷恩替卡韦。化学式分别如下：

优选地，所述有机溶剂为乙腈，所述缓冲溶液为柠檬酸钠水溶液，且柠檬酸钠的浓度按体积比为0.04％～0.06％，并用三乙胺调节pH值为6.0～8.0。

优选地，该方法中梯度洗脱程序为：0～3min，乙腈比例为2％；3～40min，乙腈比例从2％变为10％；40～50min，乙腈比例从10％变为20％；50～75min，乙腈比例从20％变为70％；75～85min，乙腈比例为70％；85～88min，乙腈比例为从70％变为2％。

进一步地，检测条件为：检测波长为249nm～259nm；流速为0.9～1.1ml/min；进样量为10～50μl；缓冲溶液中柠檬酸钠浓度按体积比为0.04％～0.06％，pH值为6.0～8.0。

优选地，检测波长为254nm；流速为1.0ml/min；进样量为20μl；缓冲溶液中柠檬酸钠浓度按体积比为0.05％，pH值为7.0。

进一步地，样品配置方法为：精密量取恩替卡韦口服溶液适量，用三乙胺调节乙腈-0.05％柠檬酸钠溶液的pH值至7.00，并使用调节过后的乙腈-0.05％柠檬酸钠溶液按2：98稀释恩替卡韦口服溶液，配制成含恩替卡韦浓度为0.020～0.030mg/ml的溶液。

优选地，含恩替卡韦溶液的浓度为0.025mg/ml。