[发明专利]一种伪狂犬病病毒的检测方法在审
| 申请号： | 202110401217.3 | 申请日： | 2021-04-14 |
| 公开（公告）号： | CN112899407A | 公开（公告）日： | 2021-06-04 |
| 发明（设计）人： | 谢芝勋;张民秀;张艳芳;谢丽基;谢志勤;李孟;邓显文;罗思思;范晴;曾婷婷;黄娇玲;王盛;李丹;刘加波 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京国谦专利代理事务所(普通合伙) 11752 | 代理人： | 肖应国 |
| 地址： | 530001 广西壮族自*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 狂犬病 病毒 检测 方法 | ||
1.一种伪狂犬病病毒的检测方法,所述检测方法包括如下步骤：(1)DNA模板扩增；(2)纳米PCR扩增；(3)PCR产物检测，其特征在于，所述纳米PCR扩增中的引物对序列选自序列表中SEQ ID No.1-2、SEQ ID No.3-4或SEQ ID No.5-6。
2.如权利要求1所述的伪狂犬病病毒的检测方法，其特征在于，所述纳米PCR反应体系为每20ul反应体系中，1μL DNA模板，2×Nano-QPCR buffer 10μL，上下游引物终浓度0.1-1μmol/L，5U/uL taq enzyme Mix0.32μL，加ddH2O补足20μL。
3.如权利要求2所述的伪狂犬病病毒的检测方法，其特征在于，所述纳米PCR反应程序为95℃反应3min；94℃反应5s，退火温度50-57℃反应5s，72℃反应30s，进行20个循环；72℃反应5min，12℃结束反应。
4.如权利要求3所述的伪狂犬病病毒的检测方法，其特征在于，所述引物对序列为序列表中SEQ ID No.1-2所示核苷酸序列。
5.如权利要求4所述的伪狂犬病病毒的检测方法，其特征在于，所述上下游引物终浓度为0.1μmol/L。
6.如权利要求4或5所述的伪狂犬病病毒的检测方法，其特征在于，所述退火温度为50℃。
7.如权利要求3所述的伪狂犬病病毒的检测方法，其特征在于，所述引物对序列为序列表中SEQ ID No.3-4所示核苷酸序列。
8.如权利要求7所述的伪狂犬病病毒的检测方法，其特征在于，所述上下游引物终浓度为1μmol/L。
9.如权利要求7或8所述的伪狂犬病病毒的检测方法，其特征在于，所述退火温度为50℃。
10.如权利要求1所述的伪狂犬病病毒的检测方法，其特征在于，所述PCR产物检测采用1.2％琼脂糖凝胶电泳验证扩增结果。
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