[发明专利]一种毛细管高度指示剂装置及其检测硫化氢的应用

说明书

本发明公开了一种毛细管高度指示剂装置及其检测硫化氢的应用，向N₃‑MBs溶液中加入硫化氢溶液，在室温下反应反应50 min;然后向混合溶液中加入Alk‑PtNPs溶液、抗坏血酸、硫酸铜、PBS缓冲溶液，在室温下反应反应30 min；将磁珠连接的PtNPs立即转移到装有过氧化氢的玻璃小瓶，立即旋上装有毛细管指示剂的硅胶盖，对毛细管上升的高度进行测量。本发明装置易于携带，可操作性强，检测方便，有望在食品安全分析上得到广泛的应用。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种毛细管高度指示剂装置及其检测硫化氢的应用。

背景技术

H₂S 是一种致命的、具有臭鸡蛋气味的毒性气体，会对人体健康造成危害，在食品、环境和医学领域中得到广泛的研究和关注。它广泛存在于各类食品中，是各种食品中的芳香活性化合物。同时， H₂S 作为一种内源性气体信号分子，具有一定的生理学作用，与心脏病、肝硬化、糖尿病、 高血压、老年痴呆和唐氏综合症等疾病有关。目前已经有许多分析方法被开发用于 H2S 的检测，例如电化学法、光学法和表面增强拉曼散射法和荧光方法中。其中，硫化氢能够还原叠氮基，形成氨基的性质被广泛应用于荧光检测方法中。但是，建立一些新型的便携性的分析方法以实现对硫化氢的检测仍具有重要意义。

Cu⁺催化的叠氮化物-炔烃环加成（CuAAC）是点击反应的典型示例，它由Cu [I]催化在两种反应物之间产生1,2,3-三唑键。目前，在分析化学中，他已广泛用于连接DNA链，和纳米偶联，他能够增加DNA链之间连接的稳定性，并且具有出色的特异性。而点击化学反应也是建立便携式检测的重要手段之一。

发明内容

本发明的目的在于提供一种毛细管高度指示剂装置用于硫化氢检测，其可用于食品、环境中铜离子的便携式初步检测。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种毛细管高度指示剂装置，其制备方法包括以下步骤：

（1）铂纳米颗粒PtNPs的制备：首先将1 mM H₂PtCl₆溶液加热到80℃保持20 min，然后添加0.4 M抗坏血酸溶液并搅拌均匀，并在80℃继续保持30 min，取1mL离心过滤获得铂纳米颗粒。H₂PtCl₆溶液与抗坏血酸溶液比例体积比为25:1。

链霉亲和素修饰的铂纳米颗粒SA–PtNPs的制备：将铂纳米颗粒在含30μg/mL 链霉亲和素的H₃BO₃（0.1 M，PH 7.5）溶液中重新悬浮，然后在37 ℃下孵育1小时。此外，添加10wt％BSA溶液，在37℃下继续孵育1h。离心后，将反应物产物重悬于含有0.1wt％BSA的0.1M，pH 7.5H₃BO ₃溶液中，获得链霉亲和素修饰的铂纳米颗粒溶液；

（2）Alk-PtNPs 溶液的制备：将10 μM两端各修饰有生物素和炔基的DNA (Bio-DNA-Alk) 溶液添加至步骤（2）制备的SA–PtNPs溶液中，并在37℃反应2 h。

（3）N₃-MBs 溶液的制备：将链霉亲和素磁珠分散于PBS缓冲溶液中，加入10 μM两端修饰有生物素和叠氮基团的DNA 溶液(Bio-DNA- N₃)，并在37℃反应2 h。

（5）向N₃-MBs溶液中加入50ul检测样品，在室温下反应，然后向混合溶液中加入Alk-PtNPs溶液、抗坏血酸、 硫酸铜、PBS缓冲溶液，形成检测体系；

（6）将步骤（5）获得的检测体系立即转移到装有过氧化氢的玻璃小瓶，立即旋上装有毛细管指示剂的硅胶盖，对毛细管上升的高度进行测量。