[发明专利]一种毛细管高度指示剂装置及其检测硫化氢的应用

权利要求书

1.一种毛细管高度指示剂装置的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）制备铂纳米颗粒PtNPs，并在含有60 μg/mL链霉亲和素的0.1 M，pH 7.5 H₃BO₃溶液中重新悬浮，在37℃下孵育1 h，添加10 wt% BSA溶液，在37℃下继续孵育1h，离心后，将反应物产物重悬于含有0.1wt% BSA的0.1M，pH 7.5 H₃BO₃溶液中，获得链霉亲和素修饰的铂纳米颗粒溶液；

（2）将两端各修饰有生物素和炔基的DNA溶液添加至步骤（1）制备的铂纳米颗粒溶液中孵育，体积比为2:5，获得炔基-DNA修饰的铂纳米粒子Alk-PtNPs；

（3）将链霉亲和素磁珠分散于PBS缓冲溶液中，加入两端修饰有生物素和叠氮基团的DNA溶液，进行反应，制备获得1mg/mL的叠氮基修饰的磁珠N₃-MBs溶液；

（4）向步骤（3）制备的叠氮基修饰的磁珠N₃-MBs溶液中加入检测样品，在室温下反应，然后向混合溶液中加入Alk-PtNPs溶液、抗坏血酸溶液、硫酸铜溶液、PBS缓冲溶液，形成检测体系；

（5）将步骤（4）获得的检测体系立即转移到装有过氧化氢溶液的玻璃小瓶，立即旋上装有毛细管指示剂的硅胶盖，对毛细管上升的高度进行测量。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（1）所述铂纳米颗粒的制备方法为：将1 mM H₂PtCl₆溶液加热到80℃保持20 min，然后添加0.4 M抗坏血酸溶液并搅拌均匀，并在80℃继续保持30 min，取1mL溶液离心过滤获得铂纳米颗粒；H₂PtCl₆溶液与抗坏血酸溶液比例体积比为25:1。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（2）所述修饰有生物素和炔基的DNA为：5’-CHCH-TGTCCGTAGCTAAAAAAAAAAAAA-Bio-3’，DNA溶液的浓度为10 μmol/L，所述孵育的温度为37 ℃，时间为2小时。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（3）所述两端修饰有生物素和叠氮基团的DNA为5’-Bio-AAAAAAAAAAAATCACAGATGAGTAGT-azido-3’，溶液的浓度为10 μM，所述反应的温度为37 ℃，时间为2 小时。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（4）所述检测体系中，N₃-MBs溶液的浓度为0.5 mg/mL，Alk-PtNPs溶液浓度0.06 μmol/L，抗坏血酸钠溶液浓度为10 mmol/L，硫酸铜溶液浓度为200 μmol/L，PBS缓冲液浓度为0.01 mol/L；所述N₃-MBs溶液：硫化氢溶液：Alk-PtNPs溶液：抗坏血酸溶液：硫酸铜溶液：PBS缓冲溶液的体积比为10:50:10:3:1:3。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（5）中过氧化氢溶液为30 wt%。

7.权利要求1-6任一所述的方法制备获得的一种毛细管高度指示剂装置。

8.权利要求7所述的毛细管高度指示剂装置在检测硫化氢中的应用。