[发明专利]一种真菌来源漆酶、其重组毕赤酵母工程菌及应用

权利要求书

1.真菌来源的漆酶基因，其特征在于：所述漆酶基因为lac1，所述lac1的cDNA序列如SEQ ID NO .2所示，或者所述lac1编码如SEQ.ID.NO .3所示氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的真菌来源的漆酶基因，其特征在于：所述lac1的全长序列如SEQ ID NO .1所示。

3.真菌来源的漆酶，其特征在于：所述漆酶的氨基酸序列如SEQ ID NO .3所示。

4.重组巴斯德毕赤酵母工程菌株，其特征在于：所述菌株携带如权利要求1所述真菌来源的漆酶基因的表达载体，所述菌株命名为Pichia pastoris-lac1，保藏编号：CGMCC No.21875，保藏日期：2021年3月8日，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址：中国 .北京市朝阳区北辰西路。

5.一种构建重组巴斯德毕赤酵母工程菌株的方法，其特征在于：包括以下步骤：以pPIC9K质粒为载体，构建lac1-pPIC9K表达载体，通过电转化将表达载体转入宿主毕赤酵母中，得到重组巴斯德毕赤酵母工程菌株；所述lcal为权利要求1真菌来源的漆酶基因。

6.采用权利要求4所述的重组巴斯德毕赤酵母工程菌株发酵获取重组漆酶的方法，其特征在于：将重组巴斯德毕赤酵母工程菌株培养后，收集菌体，用BMM培养基重悬菌体，然后加入0.5％-1％甲醇、在20-28℃诱导，200rpm振荡培养3-10天，收集发酵上清液，获得重组漆酶。

7.根据权利要求6所述的重组巴斯德毕赤酵母工程菌株发酵获取重组漆酶的方法，其特征在于：加入1％甲醇、20℃诱导，200rpm振荡培养6天。

8.一种采用权利要求6或7所述的方法获得的重组漆酶。

9.一种采用权利要求6或7所述的方法获得的重组漆酶在降解靛蓝和活性蓝中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述应用包括以下步骤：将染料溶液用去离子水溶解，加入重组漆酶酶液，室温放置。