[发明专利]具有抗菌清除自由基和抑制酪氨酸酶活性的玫烟色苷B及制备方法

说明书

本发明涉及具有抗菌清除自由基和抑制酪氨酸酶活性的玫烟色苷B及制备方法，属于生物制品的提取制备技术领域。所述玫烟色苷B为浅黄棕色粉末，是一个新型化合物，尚无文献报道。本发明化合物可通过培养玫烟色虫草菌，然后提取分离得到。玫烟色苷B纯品为浅黄棕色粉末，在200 mg/mL的浓度时，对大肠杆菌的抑菌圈为17.3 mm，对白色链珠菌的抑菌圈为19.8 mm。对二苯基苦基苯肼自由基（DPPH）的半数清除浓度（DC₅₀）为：345μg/mL。对酪氨酸酶的半数抑制浓度（IC₅₀）为：106μg/m。该化合物具有制备抗细菌和抗真菌药物潜力，以及具有制备抗氧化、美白和抗衰老保健品的潜力。

技术领域

本发明属于生物制品的提取制备技术领域，涉及具有抗氧化、抗菌和酪氨酸酶抑制活性的玫烟色苷B（fumosoroseanosideB）的提取、纯化、结构鉴定和活性测定。

背景技术

玫烟色苷B是从一株玫烟色虫草菌（ Cordyceps fumosorosea）培养物中分离制备得到的新型糖苷类物质，具有抗细菌、抗真菌、清除自由基和酪氨酸酶抑制等活性。

玫烟色虫草的无性型存在于土壤中和寄生在昆虫上，以前被称为玫烟色棒束孢（ Isariafumosorosea）或玫烟色拟青霉（ Paecilomycesfumosorosea）。该菌寄主广泛，易感染蚜虫、粉虱、甲虫、白蚁、黄蜂以及各种鳞翅目害虫，因此玫烟色虫草菌是一种重要的生物防治真菌。该类真菌由于长期与昆虫协同进化，能产生大量新型生物活性化合物，然而，目前对该类真菌代谢物的研究仍较少，尚未见有关其玫烟色苷类化合物的制备鉴定和生物活性研究报道。

近年来，由于抗生素的滥用，导致抗药细菌越来越多，亟需研发新型抗细菌物质；同时，由于环境污染以及世界人口老龄化等因素，目前免疫低下人群逐年增多，一些条件致病菌，特别是真菌感染病例也呈逐年上升趋势，因此亟需开发开发新型抗细菌和抗真菌活性物质。

最新的研究表明，人类的衰老及许多疾病都与自由基损伤有关。具有清除自由基活性的物质能与自由基反应并使之还原成非自由基化合物，可清除机体代谢过程中产生的过多的自由基，是一种可增进人体健康的重要活性物质。自由基清除剂在非生命体系中有抗氧化作用，能够有效地阻止物质的氧化败坏，对于延长物品的保质期有着重要作用，被广泛用于食品、药品、日用化学品等中，因此有必要研究开发具有清除自由基活性的天然产物。

发明内容

本发明的目的是提供具有抗细菌、抗真菌、清除自由基和抑制酪氨酸酶活性的玫烟色苷B及制备方法。

具有抗菌清除自由基和抑制酪氨酸酶活性的玫烟色苷B为浅黄棕色粉末，结构式如下：

生物活性测定显示，将玫烟色苷B配制成浓度200 mg/mL的水溶液时，对大肠杆菌的抑菌圈为11.5 mm，对白色链珠菌的抑菌圈为13.9 mm；对二苯基苦基苯肼自由基（DPPH）的半数清除浓度（DC₅₀）为：982 μg/mL。对酪氨酸酶的半数抑制浓度（IC₅₀）为：436 μg/mL。

具有抗菌清除自由基和抑制酪氨酸酶活性的玫烟色苷B的制备操作步骤如下：

（1）制备固体培养物

将玫烟色虫草菌（ Cordyceps fumosorosea）经过斜面菌种培养、二级固体种子培养和三级固体扩大培养，得到固体培养物；

（2）制备玫烟色苷B