[发明专利]基于MOF模板化硫量子点阵列检测外泌体的免标记荧光适体探针的制备方法

说明书

本发明公开了基于MOF模板化硫量子点阵列检测外泌体的免标记荧光适体探针的制备方法，以MOF为模板在金属有机骨架中原位水热制备硫量子点阵列，然后与吸附了电子受体多巴胺的特定肿瘤外泌体单链DNA适体进行自组装形成复合体系，将其作为免标记荧光适体探针，在特定肿瘤外泌体存在时，单链DNA适体与外泌体发生适‑配体特异性结合，导致多巴胺竞争性脱离硫量子点，使多巴胺引起的硫量子点荧光淬灭被抑制，随外泌体浓度(Csubgt;Exosome/subgt;)增大，硫量子点荧光发射峰强度(Isubgt;SQDs/subgt;)增强，拟合Csubgt;Exosome/subgt;与Isubgt;SQDs/subgt;之间的线性关系，构建检测外泌体的免标记荧光适体探针，用于生物流体样品中外泌体的荧光定量检测。

技术领域

本发明属于金属有机骨架复合物(MOF)、硫量子点和外泌体检测探针的制备技术领域，具体涉及一种基于MOF模板化硫量子点阵列的免标记荧光适体探针的制备方法，其制备的探针可用于外泌体的荧光定量检测。

背景技术

硫元素是地壳中第十四种丰富的元素，随着现代科学技术的飞速发展，各种类型的硫基材料包括单质硫、纳米硫、聚合物硫、硫复合材料和等离子体纳米硫结构，在农业、军事、医药、纺织等重要领域显示出广泛的应用前景。近年来，零-维(0D)硫纳米材料的科学研究取得了较快发展，陆续制备出硫纳米颗粒、硫量子点、表面修饰的0D硫纳米材料，及其核/壳、多孔、复合、杂化、自组装等多功能纳米结构。作为当前活跃的科学研究方向之一，0D硫纳米材料具备合成简便、功能多样等诸多优点，在储能、光电转换、光/电催化、传感、生物成像、生物医学、分离/富集、抗菌、植物生长调节等重要领域展现出优异的应用表现。

荧光0D硫纳米颗粒(硫量子点)已有文献报导，通常采用自下而上 (bottom-up)和自上而下(top-down)两种合成策略进行制备。在自下而上合成中常以聚合物、表面活性或生物分子为稳定剂，硫代硫酸钠或金属多硫化物为硫源，在室温或100℃以下的溶液中与盐酸或无机酸反应制备硫量子点。在自上而下合成中常以聚乙二醇系列物为稳定剂，升华硫粉为硫源，在室温或100℃以下的溶液中与氢氧化钠或辅助剂反应制备硫量子点，或升华硫粉经酸化、机械研磨等处理进行制备。

Arshad等以硫代硫酸钠为硫源，聚乙二醇(PEG-400)为稳定剂，在70℃水溶液中与草酸反应制备了荧光硫量子点(Farwa Arshad,Md Palashuddin Sk. Luminescent sulfurquantum dots for colorimetric discrimination of multiple metal ions.ACSApplied Nano Materials,2020,3,3044-3049.)。Shen等以升华硫粉为硫源，PEG-400为稳定剂，在70℃水溶液中与氢氧化钠反应制备了荧光硫量子点 (Lihua Shen,Hongni Wang,Shengnan Liu,Zhuangwei Bai,Sichun Zhang,Xinrong Zhang,ChengxiaoZhang.Assembling of sulfur quantum dots in fission of sublimed sulfur.Journalof the American Chemical Society,2018,140,7878-7884.)。彭花萍等以PEG-400为助溶剂和钝化剂，在碱性条件下采用超声微波辅助法制备了硫量子点，基于Ce(IV)对其荧光的淬灭作用以及Ce(IV)与抗坏血酸的氧化还原反应，硫量子点的荧光淬灭被抑制，实现对抗坏血酸的定量检测(彭花萍；盛依伦；黄种南；魏朝国；陈伟.一种高量子产率硫量子点的制备及其用于抗坏血酸的测定方法. 国家发明专利申请号CN202010779840.8)。