[发明专利]基于MOF模板化硫量子点阵列检测外泌体的免标记荧光适体探针的制备方法

权利要求书

1.基于MOF模板化硫量子点阵列检测外泌体的免标记荧光适体探针的制备方法，其特征在于，该方法具体包括以下步骤：

（1）金属有机骨架化合物MOF的制备：配制六水合硝酸锌的乙醇溶液，配制2-甲基咪唑的乙醇溶液，在搅拌下将二者混合均匀，然后在室温下放置一段时间以生成目标产物，产物溶液经离心分离、洗涤、干燥处理得到MOF干粉，配制MOF的乙醇分散液备用；

（2）MOF包覆硫量子点阵列SQDs@MOF的制备：硫化钠和升华硫粉溶于蒸馏水，二者反应生成多硫化钠，加入聚乙二醇PEG-400，反应以形成混合溶液(1)，在搅拌下将混合溶液(1)逐滴加入含有溶解乙二酸和PEG-400的混合水溶液中，形成混合溶液(2)，在搅拌下将MOF的乙醇分散液加入混合溶液(2)中，加热反应一段时间生成目标产物，产物溶液经离心分离、洗涤、干燥处理后得到SQDs@MOF干粉，配制SQDs@MOF的水分散液备用；

（3）自组装体SQDs@MOF/Aptamer-DNA/DA的制备：将外泌体Exosome单链DNA适体Aptamer-DNA分散在磷酸盐缓冲液PBS中，加入多巴胺DA后形成Aptamer-DNA/DA复合物，在搅拌下将此复合物溶液逐滴加入含SQDs@MOF的水分散液中，形成SQDs@MOF/Aptamer-DNA/DA自组装体；

（4）检测外泌体的免标记荧光适体探针的制备：配制商品化肿瘤外泌体的水分散液，在搅拌下将其逐滴加入自组装体的PBS中以形成均匀的混合液，固定混合液中自组装体的浓度，调节外泌体的浓度在一定范围内逐渐增大，配制成多份混合液，分别测量每一份含不同外泌体浓度C_Exosome的混合液的荧光发射光谱，并记录对应的荧光发射峰强度值(I)，设定不加外泌体的混合液荧光发射峰强度值为I₀，拟合I/I₀比值与C_Exosome的之间的线性关系，构建了基于SQDs@MOF检测外泌体的免标记荧光适体探针，其中对外泌体浓度的线性检测范围为10~1×10⁷ particles mL^–1，检测限为10~50 particles mL^–1。