[发明专利]一种负压平衡离心制片方法

权利要求书

1.一种负压平衡离心制片方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1，制作涂覆有粘附剂的载玻片，并安装于玻片架上；

S2，将制片仓安装在玻片架上并压紧载玻片，将装有处理液、细胞标本液的混合液的离心瓶安装在制片仓的另一端上形成离心套件，并使制片仓内腔与大气保持通畅，其中离心瓶的一端具有细小开口其余部分密封，所述离心瓶包括离心瓶本体，所述离心瓶本体与所述细小开口之间通过细管相连，所述细小开口朝向载玻片并与载玻片之间保持一定距离；

S3，将离心套件安装在离心机上，启动离心机；

S4，将离心机转速提升至转速N₂，维持转速N₂一段时间，其中转速N₂产生的离心力使得离心瓶内的混合液经所述细小开口甩出至制片仓中并流向载玻片，直到制片仓中的混合液至少淹没过所述细小开口，离心瓶与制片仓形成了单端开口的联通管；液体不断由离心瓶流入制片仓，离心瓶内的空间不断增大，空间气压随之变小，由于制片仓与大气连通，制片仓内的液面始终受到大气压力，当离心瓶内的气压与液体离心力对制片仓液面产生的压强之和等于大气压时，即离心力对制片仓液面所产生的压强与离心瓶内负压相等时，即离心瓶内的负压与离心力平衡，在离心力的作用下，细胞不断移动至处理液中，并持续向制片仓方向移动；

S5、离心机转速增加至转速N₁并维持一段时间；当离心瓶内的负压再次与离心力达到平衡时，离心瓶内的液体流入制片仓的总体积不再增加，细胞依然持续通过细管流入制片仓，一部分细胞被载玻片上的粘附剂吸附；

S6，将离心机的转速逐渐降低到转速N₂并维持一段时间，使得制片仓中淹没过所述细小开口的混合液被吸回离心瓶内，离心瓶内的细胞可以在离心力与负压平衡时源源不断地经细管向细小开口的方向移动；

S7，重复S5、S6步骤直至使足够数量的细胞附着于载玻片上。

2.根据权利要求1所述的负压平衡离心制片方法，其特征在于，所述细小开口与载玻片之间的距离为 0.5-15mm。

3.根据权利要求1所述的负压平衡离心制片方法，其特征在于，所述细小开口的内径为1-3mm。

4.根据权利要求3所述的负压平衡离心制片方法，其特征在于，所述细管与所述离心瓶本体之间通过锥形体相连。

5.根据权利要求1所述的负压平衡离心制片方法，其特征在于，所述转速N₁范围为 200-1000转/分钟，所述转速N₂范围为 100-900转/分钟。