[发明专利]一种水稻内生真菌稻镰状瓶霉的工厂化液体发酵培养基及培养方法

说明书

本发明公开了一种水稻内生真菌稻镰状瓶霉的工厂化液体发酵培养基及培养方法，一种水稻内生真菌稻镰状瓶霉的工厂化液体发酵培养基，包括重量比例为3～5g/L的葡萄糖、3～5g/L的黄豆饼粉、8～12g/L的玉米粉、0.3～0.5g/L的蛋白胨、0.5～1g/L的酵母粉、0.5～1.5g/L的稻秆提取物、0.5～1g/L的磷酸二氢钾以及0.3～0.5g/L的硫酸镁，剩余为水，一种水稻内生真菌稻镰状瓶霉的培养方法，包括a)培养基的制备、b)母种制备和c)菌种培养。本发明培养基原料成分常规，配置方便，成本低廉，发酵条件可控，简单易行，适合工厂化生产，生产成本低，操作简便，条件可控，效率高，适合于稻镰状瓶霉菌的产业化应用。

【技术领域】

本发明涉及稻镰状瓶霉的技术领域，特别是一种水稻内生真菌稻镰状瓶霉的工厂化液体发酵培养基及培养方法的技术领域。

【背景技术】

植物内生真菌是指至少生活史的一部分能侵染定殖在健康植物组织中，宿主无明显病症的一类真菌(Wilson D,1995.Endophyte-the evolution of a term,andclarification.Oikos,73:274-276)，其普遍存在于各种植物中，与宿主植物保持着协同进化和互惠共生等多种共生关系。植物内生真菌从寄主植物中获取水分和矿物营养等生长所需的养分(Usuki F,Narisawa K,2007.A mutualistic symbiosis between a darkseptate endophytic fungus,Heteroconium chaetospira,and a nonmycorrhizalplant,Chinese cabbage.Mycologia,99:175-184)，同时赋予寄主植物丰富多样的生物学功能，可促进植物生长、提高植物生物量、增强寄主植物抗生物和非生物胁迫能力(ArnoldAE,Mejía LC,Kyllo D,Rojas EI,Maynard Z,Robbins N,Herre EA,2003.Fungalendophytes limit pathogen damage in a tropical tree.Proceedings of theNational Academy of Sciences of USA,100:15649-15654)。

稻镰状瓶霉(Falciphora oryzae)，菌株标号为A20-1-1(CCTCC NO：M 2020201)，是从疣粒野生稻根部分离的一株内生真菌。盆栽试验表明，稻镰状瓶霉根部定殖能够显著提高水稻叶宽、茎秆直径、植株鲜(干)重、叶绿素含量和光合强度等多种农艺性状指标，通过上调表达营养元素吸收相关基因，促进根系对营养元素的吸收，进而促进水稻植株生长(苏珍珠，冯晓晓，汪彦欣，刘小红，章初龙，林福呈.稻镰状瓶霉促进水稻生长的机制，菌物学报，2019，38(11)：2007-2015)。稻镰状瓶霉菌株还能够诱导水稻产生系统抗病性，抵抗稻瘟病菌的叶部侵染(Su ZZ,Mao LJ,Li N,Feng XX,Yuan ZL,Wang LW,Lin FC,Zhang CL,2013.Evidence for biotrophic lifestyle and biocontrol potential of darkseptate endophyte Harpophora oryzae to rice blast disease.PLoS One,8:e61332)；稻镰状瓶霉田间对水稻苗叶瘟的防效达到70％以上，可用于稻瘟病防治(王国迪，陈瑞，汪彦欣，冯晓晓，章初龙，林福呈.内生真菌稻镰状瓶霉对直播稻稻瘟病的防治效果，中国稻米，2019，25(4)：68-69)。苏珍珠等(2019)还发现稻镰状瓶霉对水稻白叶枯病的防治效果高达80.75％(苏珍珠，冯晓晓，汪彦欣，刘小红，章初龙，林福呈.稻镰状瓶霉对水稻白叶枯病的生物防治，菌物学报，2019，38(6)：802-810)。此外，申请号为201410068912.2的专利申请中公开了稻镰状瓶霉具有降低烟草中重金属镉含量的用途，而申请号为201910044093.0的专利申请中公开了稻镰状瓶霉在防治水稻白叶枯病中的应用。