[发明专利]一种水稻内生真菌稻镰状瓶霉的工厂化液体发酵培养基及培养方法

权利要求书

1.一种水稻内生真菌稻镰状瓶霉的培养方法，其特征在于包括如下步骤：

a)培养基的制备：称取重量比例为3～5g/L的葡萄糖、3～5g/L的黄豆饼粉、8～12g/L的玉米粉、0.3～0.5g/L的蛋白胨、0.5～1g/L的酵母粉、0.5～1.5g/L的稻秆提取物、0.5～1g/L的磷酸二氢钾以及0.3～0.5g/L的硫酸镁，剩余为水，混匀并灭菌，得到工厂化液体发酵培养基；

b)母种制备：将常温活化后的稻镰状瓶霉菌株菌种在无菌条件下接种于斜面培养基中进行培养，再将制备好的稻镰状瓶霉菌种斜面洗下，并接种至液体培养基之中进行培养，得到种子液；

c)菌种培养：将步骤b)中所制备的种子液接种至步骤a)中所制备的工厂化液体发酵培养基之中进行培养，得到稻镰状瓶霉菌球，采用摇瓶培养方式，种子液接种至工厂化液体发酵培养基之中的接种量为3～5%，培养温度为23～28℃，振荡速度为150～210rpm，培养时间为6～8天；采用发酵罐培养方式，种子液接种至工厂化液体发酵培养基之中的接种量为0.2～0.6%，发酵罐通气为1：0.3～0.5，维持罐压为0.01～0.05Mpa，发酵温度为23～28℃，发酵周期为10～14d。

2.如权利要求1所述的一种水稻内生真菌稻镰状瓶霉的培养方法，其特征在于：所述步骤a)中，灭菌温度为121～126℃，灭菌压力为0.12～0.15Mpa，灭菌时间为2～4h。

3.如权利要求1所述的一种水稻内生真菌稻镰状瓶霉的培养方法，其特征在于：所述步骤b)中，斜面培养时，培养温度为23～28℃，培养时间为72～96h，稻镰状瓶霉菌种斜面接种于液体培养基之中的接种量为0.5～1.5%，液体培养基为PDA液体培养基，液体培养时，搅拌速度为100～200rpm，培养时间为10～14h。