[发明专利]一种多肽中测定N,N-二异丙基碳二亚胺含量的气相分析方法

权利要求书

1.一种多肽中测定N,N-二异丙基碳二亚胺含量的气相分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)取N,N-二异丙基碳二酰亚胺适量，用有机溶剂和混合溶剂稀释至一定浓度，作为对照品贮备液；取待测胸腺法新样品，加入碱性溶剂使其溶解后，再加入适量对照品贮备液，混匀并用混合溶剂稀释至一定浓度，作为对照品溶液；

2)取待测胸腺法新样品适量，加入碱性溶剂使其溶解后，再用混合溶剂进行稀释，作为供试品溶液；

3)采用气相色谱法对上述溶液进行检测，其中气相色谱条件为：

色谱柱：100％二甲基聚硅氧烷为固定相的色谱柱；

色谱柱升温程序：起始柱温为40℃；保持时间为2分钟；以5℃/min的升温速率升至80℃，维持3分钟；再以5℃/min的升温速率升至120℃，维持3分钟；再以10℃/min的升温速率升至180℃，维持7分钟；再以10℃/min的升温速率升至240℃，维持17分钟；

柱流量为1ml/min；

载气为高纯度氮气或氦气；

分流进样的分流比为1∶1～15∶1；

4)按标准加入法计算被测样品中N,N-二异丙基碳二亚胺的含量；

其中，所述碱性溶剂为氢氧化钠溶液，浓度为0.5％～1.0％；所述有机溶剂选自甲醇、乙醇或它们任意混合的溶液，所述混合溶剂选自水与甲醇、水与乙醇或水与甲醇和乙醇它们任意混合的溶液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述碱性溶剂为1.0％的氢氧化钠溶液；所述混合溶剂为90％的甲醇水溶液。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中分流进样的分流比为5∶1。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤3)中的气相色谱仪的进样口温度为150℃～300℃；检测器温度为150℃～350℃，进样体积1μl～10μl。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，色谱仪的进样口温度为250℃；检测器温度为250℃；进样体积为1μl。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤1)中的待测胸腺法新样品溶液中胸腺法新的浓度为10mg/ml～300mg/ml。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，待测胸腺法新样品溶液中胸腺法新的浓度为20mg/ml。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对照品贮备液浓度为10μg/ml～1500μg/ml。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，对照品贮备液浓度为20μg/ml。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)、精密称取N,N-二异丙基碳二酰亚胺200mg，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加90％甲醇稀释至刻度，作为对照品贮备液，精密称取胸腺法新约200mg，置10ml量瓶中，加入1％氢氧化钠溶液2ml溶解，再加对照品贮备液2ml，混匀，用90％甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液；

2)、精密称取胸腺法新约200mg，置10ml量瓶中，加入1％氢氧化钠溶液2ml溶解，用90％甲醇稀释至刻度，作为供试品溶液；

3)、采用气相色谱法对上述溶液进行检测，其中气相色谱条件为：

色谱柱：100％二甲基聚硅氧烷毛细管柱DB-1，型号30m×0.53mm×5μm；流速：1ml/min，分流比：5:1，进样体积：1μl；进样口温度：250℃；检测器温度：250℃；

色谱柱升温程序，起始柱温为40℃；保持时间为2分钟；以5℃/min的升温速率升至80℃，维持3分钟；再以5℃/min的升温速率升至120℃，维持3分钟；再以10℃/min的升温速率升至180℃，维持7分钟；再以10℃/min的升温速率升至240℃，维持17分钟；

4)按标准加入法计算被测样品中N,N-二异丙基碳二亚胺的含量。