[发明专利]一种含有金柚幼果多糖的石斑鱼饲料及其制备方法

权利要求书

1.一种含有金柚幼果多糖的珍珠龙胆石斑鱼饲料，其特征在于，由以下成分及其重量份数组成：

白鱼粉45份、豆粕18份、面粉19.8~20份、啤酒酵母2份、鱼油5份、大豆油5份、大豆卵磷脂1份、氯化胆碱0.5份、维生素C磷酸酯0.5份、磷酸二氢钙1份、维生素和矿物质预混料2份和添加剂0.04~0.08份，所述添加剂为金柚幼果多糖；

所述金柚幼果多糖的制备方法为：

S1、金柚幼果干燥后制成粉末，按照料液比为1:30加入去离子水，加入果胶酶和纤维素酶在pH为6.0，温度为50℃的条件下发酵1.5-3h，所述果胶酶和纤维素酶的总添加量为2%w/v；

S2、对步骤S1获取的产物灭酶后，通过超声波破壁萃取；

S3、超声破壁萃取后，对萃取液进行离心和浓缩，采用三氯乙酸脱蛋白，用四倍体积的乙醇在4℃条件下沉淀，过夜分层，取沉淀；

S4、将1g下层的沉淀溶于去离子水中，加热，斡旋，12000rpm离心，取上清液并注入DEAESepharose Fast Flow柱上样，调整流速为15ml/min的蒸馏水进行洗脱，三组溶剂洗脱，具体为三倍柱体积的水、0.2M NaCl、0.5M NaCl、2.0M NaCl洗，苯酚硫酸法进行追踪检测，酶标仪490nm进行检测，根据峰形，分别收集，浓缩，3500Da透析袋透析，冷冻干燥；所述DEAESepharose Fast Flow柱填料先用0.5mol/ml的盐酸浸泡1小时，洗去填料中的杂质，用4~5倍体积的蒸馏水洗脱至中性，调整流速为5ml/min，蒸馏水平衡2h；

S5、将步骤S4冷冻干燥的多糖馏分制成1mg/mL的多糖溶液，用于SephadexG-200柱上进行纯化，HPGPC测定多糖分子量和纯度，收集特定分子量的目的金柚幼果多糖，所述目的金柚幼果多糖的分子量图谱数据为RT-34.356min，lgMp-5.4，lgMw-5.6，lgMn-5.3，Mp-271395，Mw-383912，Mn-220069。

2.如权利要求1所述的含有金柚幼果多糖的珍珠龙胆石斑鱼饲料，其特征在于，所述维生素和矿物质预混料的前处理步骤为：

将金柚幼果多糖加入温度为55~65℃的饮用水中搅拌均匀，得胶体溶液，冷却，接着将胶体溶液加入到维生素和矿物质预混料中搅拌均匀，所述金柚幼果多糖为权利要求1制得。

3.如权利要求2所述的含有金柚幼果多糖的珍珠龙胆石斑鱼饲料，其特征在于，所述胶体溶液的添加重量是维生素和矿物质预混料总重量的8~15%。

4.如权利要求3所述的含有金柚幼果多糖的珍珠龙胆石斑鱼饲料，其特征在于，所述胶体溶液的添加重量是维生素和矿物质预混料总重量的10~12%。

5.如权利要求1所述的含有金柚幼果多糖的珍珠龙胆石斑鱼饲料，其特征在于，所述添加剂还包括茶黄素，其中，添加剂中金柚幼果多糖与茶黄素的质量比为1:（0.1~0.4）。

6.如权利要求5所述的含有金柚幼果多糖的珍珠龙胆石斑鱼饲料，其特征在于，所述添加剂中金柚幼果多糖与茶黄素的质量比为1:0.2。