[发明专利]一种兽用益母生化合剂的甘草检测方法

权利要求书

1.一种兽用益母生化合剂的甘草检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、供试品溶液的制备：取供试品10-30ml，通过D101型大孔吸附树脂柱，用水50-150ml冲洗后，再用洗脱液20-40ml进行洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1-3ml溶解，取上清液作为供试品溶液；

S2、甘草药材对照品溶液的制备：取甘草药材对照品0.3-0.8g，加水20-40ml，加热回流15-45min，滤过，滤液浓缩至3-5ml，加90％乙醇，使含醇量达85％，静置18-32h，滤过，滤液蒸干，残渣加水3-8ml溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱，用水50-150ml冲洗后，再用洗脱液20-40ml进行洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1-3ml溶解，取上清液作为甘草药材对照品溶液；

S3、薄层色谱鉴定：吸取所述供试品溶液2μL-6μL，所述对照品溶液6μL-12μL，分别点于同一薄层色谱板上，以体积比为40:10:1:3的三氯甲烷-甲醇-水-苯氧乙醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至薄层色谱板上斑点显色清晰，置于日光或灯光下检视，当供试品溶液色谱中，在与甘草药材对照品溶液色谱相应位置上，显相同颜色的斑点时，判定所述供试品内含有甘草药材，

洗脱液由60％乙醇与稳定剂组成。

2.根据权利要求1所述的兽用益母生化合剂的甘草检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、供试品溶液的制备：取供试品20ml，通过D101型大孔吸附树脂柱，用水100ml冲洗后，再用洗脱液30ml进行洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，取上清液作为供试品溶液；

S2、甘草药材对照品溶液的制备：取甘草药材对照品0.5g，加水30ml，加热回流30min，滤过，滤液浓缩至4ml，加90％乙醇，使含醇量达85％，静置24h，滤过，滤液蒸干，残渣加水5ml溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱，用水100ml冲洗后，再用洗脱液30ml进行洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，取上清液作为甘草药材对照品溶液；

S3、薄层色谱鉴定：吸取所述供试品溶液4μL，所述对照品溶液8μL，分别点于同一薄层色谱板上，以体积比为40:10:1:3的三氯甲烷-甲醇-水-苯氧乙醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，加热至薄层色谱板上斑点显色清晰，置于日光或灯光下检视，当供试品溶液色谱中，在与甘草药材对照品溶液色谱相应位置上，显相同颜色的斑点时，判定所述供试品内含有甘草药材。

3.根据权利要求1或2所述的兽用益母生化合剂的甘草检测方法，其特征在于，所述洗脱液由60％乙醇与稳定剂组成，稳定剂与60％乙醇的体积比为1：(40-50)。

4.根据权利要求3所述的兽用益母生化合剂的甘草检测方法，其特征在于，所述稳定剂由二苯基硫脲和硬脂酰苯烷组成，二苯基硫脲和硬脂酰苯烷的质量比为1：(0.5-3)。

5.根据权利要求1或2所述的兽用益母生化合剂的甘草检测方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂柱的内径为1cm，柱高为12cm。

6.根据权利要求1所述的兽用益母生化合剂的甘草检测方法，其特征在于，所述薄层色谱板为普通硅胶G预制板。

7.根据权利要求1或2所述的兽用益母生化合剂的甘草检测方法，其特征在于，所述S3中，加热至薄层色谱板上斑点显色清晰中，加热温度为105℃。