[发明专利]一种植物乳杆菌及其应用

权利要求书

1.一种植物乳杆菌，其特征在于，命名为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）NKK20，该菌株已于2020年10月19日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：M2020596，保藏地址为中华人民共和国湖北省武汉市武汉大学。

2.根据权利要求1所述的植物乳杆菌菌株，其特征在于，所述菌株能够耐酸、耐胆盐，代谢生成乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸，该菌株能够粘附肠粘膜，抑制金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌生长。

3.一种菌剂，其特征在于，活性成分中含有权利要求1-2中任一项所述的植物乳杆菌菌株。

4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于，该菌剂在发酵冷冻干燥制备过程中，添加有冷冻干燥保护剂，冷冻干燥保护剂成分为：水60%-80%，脱脂乳粉6%-14%，蔗糖2%-8%，甘露糖醇4%-7%，吐温-80 1%-2.5%，甜菜碱1%-3%，谷氨酸钠0.5%-1.2%，可溶性淀粉2%-8%。

5.根据权利要求4所述的菌剂，其特征在于，冷冻干燥保护剂成分为：水70%，脱脂乳粉10%，蔗糖5%，甘露糖醇5%，吐温-80 2%，甜菜碱2%，谷氨酸钠1%，可溶性淀粉5%。

6.根据权利要求4-5中任一项所述的菌剂，其特征在于，菌剂在制备过程中经5%-10%壳聚糖溶液与4%-10%海藻酸钠溶液进行包埋保护。

7.一种组合物，其特征在于，成分中含有权利要求3-6中任一项所述的菌剂。

8.一种如权利要求7所述的组合物在制备食品、健康营养品或酸奶发酵剂中的应用。

9.一种如权利要求7所述的组合物在制备抑制胃肠道致病菌的药物中的应用。

10.一种植物乳杆菌的冻干粉的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）发酵培养：

将权利要求1所述的植物乳杆菌NKK20按3%-15%接种量接种于高产培养基中，36℃-39℃发酵培养16-20h；活菌量达到108CFU/ml-1010CFU/ml时，将发酵液降温至20℃以下，离心，收获菌泥；

其中，高产培养基为水溶液，含有：大豆蛋白胨6-10g/L，酵母浸粉3-8g/L，无水葡萄糖15-28g/L，乙酸钠3-6g/L，大豆卵磷脂3g/L-10g/L，磷酸氢二钾1.8-2.2g/L，柠檬酸氢二铵1.5-2.5g/L，硫酸镁0.1-0.3g/L，硫酸锰0.02-0.06g/L，吐温-80 0.5-2.0ml/L，L-半胱氨酸盐酸盐0.05-0.25g/L，pH值5.5-6.5；

（2）保护剂乳化：

将收获的菌泥稀释至含水量60%-80%，等体积加入菌泥保护剂进行乳化；

其中，菌泥保护剂成分为：水70%，脱脂乳粉10%，蔗糖5%，甘露糖醇5%，吐温-80 2%，甜菜碱2%，谷氨酸钠1%，可溶性淀粉5%；

（3）菌体包埋保护：

乳化液中加入壳聚糖溶液，搅拌均匀，搅拌时间为1-2min，搅拌转速为100-120rpm；再加入与壳聚糖溶液等体积的海藻酸钠溶液，继续搅拌，搅拌时间为1-2min，搅拌转速为60-70rpm；

其中，乳化液：壳聚糖溶液的体积比为4:1；壳聚糖溶液浓度为5%-10%；海藻酸钠溶液浓度为4%-10%；

（4）真空冷冻干燥，即得植物乳杆菌NKK20冻干粉。

11.根据权利要求10所述的一种植物乳杆菌的冻干粉的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，壳聚糖溶液浓度为7.0%；海藻酸钠溶液浓度为6.5%。